Avaliação do efeito antitumoral do tratamento combinado com C6-ceramida e 7-cetocolesterol em uma linhagem celular de câncer de mama

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Rosa, Leonardo Rokita de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Breast neoplasms; Cell death; Ceramida; Ceramide; Combined therapy; Morte celular; Neoplasias da mama; Oxisteróis; Oxysterols; Terapia combinada
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5167/tde-11012022-122756/

A busca por novas terapias antitumorais é incessante. A ceramida, molécula central no metabolismo dos esfingolipídeos, vem recebendo grande atenção na literatura devido a seu papel na regulação de processos celulares como proliferação celular, apoptose, autofagia, entre outros. A C6-ceramida, um análogo de cadeia curta, vem sendo vastamente explorada por conta de sua capacidade de indução de morte celular tumoral, principalmente quando em associação com outro composto antitumoral. Nesses estudos, os achados apontam para uma inibição sinergística do tumor, com redução da toxicidade do tratamento e até reversão do fenótipo de múltipla resistência a drogas (MDR). O 7-cetocolesterol (7-KC), por sua vez, é um oxisterol com promissora atividade antitumoral, capaz de induzir um modo complexo de morte celular que envolve estresse oxidativo, apoptose e autofagia (oxiapoptofagia). Neste projeto, buscamos avaliar o potencial terapêutico antitumoral do tratamento combinada com as moléculas de C6-cer e 7-KC em uma linhagem de câncer de mama (MDA-MB-231), visando elucidar os mecanismos de morte celular envolvidos no processo. A eficácia da combinação dessas moléculas mostrou-se tempo-dependente, pois células tratadas por 24 horas apresentaram efeitos irrisórios de morte celular em comparação com tratamento por 48 horas. Em ambos os casos, as moléculas agiram de maneira sinérgica, evidenciado pelo cálculo do índice combinatório (CI). A apoptose com ativação das caspases 3/7 apresentou-se como protagonista na indução da morte dessas células, ocorrendo de forma dose-dependente. Além disso, pudemos verificar efeitos substanciais desse tratamento no potencial da membrana mitocondrial e da estrutura do citoesqueleto por meio da análise da organização estrutural da F-actina. Quanto à geração de ROS, a C6-cer, mas não o 7-KC, foi capaz de produzir ROS após o tratamento. Finalmente, a autofagia não foi desencadeada por nenhuma dessas moléculas, seja em administração individual ou em combinação. Acreditamos que nossos resultados sobre a eficácia deste tratamento combinado nesta linhagem celular específica podem abrir caminho para estudos em diferentes linhas de células cancerígenas ou modelos mais complexos daqui em diante, visando verificar se este efeito também é conservado em outros modelos tumorais bem como compreender mais a fundo os processos de sinalização celular e moléculas envolvidas no desencadeamento de morte celular tumoral