Proteínas de comunicação e de junções celulares no epitélio reticular de fetos bovinos, bezerros recém-nascidos e bovinos adultos

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Olio, Rennan Lopes
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Caderinas; Cadherins; Cateninas; Catenins; Conexinas; Connexins; Estereologia; Immunohistochemistry; Imuno-histoquímica; Stereology
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-06122022-112856/

O retículo é um dos pré-estômagos dos ruminantes. Ele se desenvolve somaticamente desde a fase pré-natal até ao fim do período de alimentação do leite. O epitélio reticular e a parede sofrem uma remodelação extensiva durante estas fases. Durante o desmame, o retículo começa a receber estímulos alimentares e finalmente torna-se funcional como órgão digestivo. Este trabalho visou descrever e elucidar alguns processos que contribuem para o remodelamento durante as fases fetais, nos bezerros recém-nascidos e bovinos adultos do epitélio reticular em seu rumo a um estado funcional, principalmente a formação e a caracterização das junções comunicantes 26, 32, 40 e 43. A presença de junções de adesão foi verificada através da identificação de E-cadherin e α- e β-catenins. Como premissa para esta abordagem, estudamos a histologia do órgão durante seu desenvolvimento. Foram utilizadas ferramentas estereológicas para calcular o volume da parede reticular e a densidade relativa do volume das camadas da parede. Foram calculados os índices de proliferação celular e de apoptose utilizando respectivamente marcadores Ki67 e caspase-3 clivados. Estudamos também a presença das conexinas 26, 32, 40 e 43 e proteínas das junções de adesão E-caderina, α e β-cateninas. Os resultados mostram que o volume da parede reticular do adulto é cerca de 37 vezes maior que a do bezerro recém-nascido, contudo, a relação entre o volume da parede em relação ao volume total (volume da parede + volume do lúmen) se mantém constante ao longo do desenvolvimento até a vida adulta. No adulto, a camada muscular compõe quase metade do volume total da parede, em função possivelmente do maior trabalho muscular de contração e motilidade nesta faixa etária. Nos fetos está presente uma estrutura epitelial transitória no interior da qual se desenvolvem as cristas reticulares a qual desaparece após o nascimento. O índice de proliferação pelo Ki67 é maior nos fetos de 110 dias, sendo que o índice de apoptose é maior no bovino adulto. As conexinas estudadas estão sempre presentes no epitélio, seja no citoplasma ou na membrana, mas sua presença na membrana formando junções, isto é, atuando funcionalmente na comunicação celular, varia com a idade e com o estrato epitelial. A Cx43 foi encontrada formando junções na membrana celular em todos os estratos epiteliais e todas as faixas etárias, então nas comparações a seguir sua presença fica subentendida. No estrato basal, principal responsável pela renovação das células do epitélio, as Cxs32 e 40 tornam-se funcionais nos fetos e bezerros, mas não no adulto. Neste último apenas a Cx26 se torna funcional, estando presente no citoplasma em modo de espera nas outras fases. Nos estratos superiores do epitélio, onde as Cxs podem contribuir para a diferenciação, migração e manutenção celular, além da sincronização dos eventos epiteliais, a Cx32 apenas não é funcional nos adultos, e Cx40 não é funcional nos fetos, não contribuindo para a diferenciação e manutenção epitelial nestas fases. A Cx26 forma junções funcionais em todas as idades. Assim, a Cx43, por apresentar-se sempre funcional, parece ter uma função mais genérica nos processos celulares epiteliais, enquanto as outras parecem contribuir mais especificamente e localizadamente, dependendo da faixa etária e do processo biológico que predomina no estrato analisado. Em suma, para a diferenciação, migração e manutenção celular nos estratos superiores a Cx40 é importante para bezerros e adultos e a Cx32 para os fetos e bezerros. As Cxs26 e 43 são importantes em todas as fases etárias nos estratos superiores. A presença de E-caderina, α e βcateninas na membrana revelou que a integridade estrutural do epitélio é reforçada pelas junções de adesão, proporcionando um ambiente propício para a formação de junções comunicantes.