Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2023 |
| Autor(a) principal: |
Keingeski, Melina Belén |
| Orientador(a): |
Cruz, Carolina Uribe |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
spa |
| Instituição de defesa: |
Não Informado pela instituição
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
http://hdl.handle.net/10183/271346
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Resumo: |
Antecedentes/Objetivos: A MASLD compreende um espectro de patologias, que vão desde esteatose até carcinoma hepatocelular. Portanto, identificar as primeiras etapas é importante para evitar a progressão da doença. Assim, vesículas extracelulares (EVs) e microRNAs, importantes na comunicação celular e envolvidos nos mecanismos da MASLD, surgiram como possíveis indicadores sensíveis e específicos da progressão da doença para auxiliar no diagnóstico precoce. No entanto, ainda faltam estudos que ajudem a confirmar seu uso como biomarcadores. Este estudo tem como objetivo avaliar o papel das EVs e microRNAs em modelos experimentais e em pacientes com MASLD em suas diferentes etapas evolutivas. Metodologia: No estudo experimental, ratos Sprague Dawley adultos machos foram aleatoriamente designados a dois modelos experimentais de MASLD: animais MASLD-16 e MASLD-28 receberam uma dieta hiperlipídica deficiente em colina (DHDC), enquanto animais Controle-16 e Controle-28 receberam uma dieta padrão (SD) por 16 e 28 semanas, respectivamente. Amostras biológicas e variáveis previamente coletadas dos modelos animais MASLD foram utilizadas. As EVs do tecido hepático foram caracterizadas por microscopia confocal. Do soro, EVs foram isoladas por ultracentrifugação diferencial e caracterizadas por Nanosight. Além disso, dados das EVs séricas foram correlacionados com parâmetros bioquímicos, moleculares e histopatológicos da MASLD. No estudo clínico, foram incluídos 167 5 pacientes com MASLD e 50 controles. As EVs foram isoladas do soro por cromatografia de exclusão de tamanho e caracterizadas com Nanosight, citometria de fluxo e WB. Usando EVs previamente isoladas de animais MASLD e seus controles, a expressão de miR-122 foi avaliada e comparada com sua expressão no soro. A expressão de miR-122, miR-4758, miR-188 e miR-1226 foi avaliada dentro das EVs e no soro de pacientes com MASLD e controles. Resultados: No estudo experimental, foram identificadas EVs no tecido hepático de animais MASLD. Houve uma diminuição na concentração de EVs séricas em MASLD-28 vs Controle-28 (p<0.01) e um aumento significativo na concentração de EVs séricas no Controle-28 comparado com o Controle-16 (p<0.01). Em MASLD-16, houve uma forte correlação entre a concentração de EVs séricas e a expressão gênica hepática das citocinas inflamatórias Il6 (r2 = 0,685, p<0.05), Il1b (r2 = 0,697, p<0,05) e Tnfa (r2 = 0,636, p<0,05). Em MASLD-28, houve uma forte correlação entre o tamanho das EVs séricas e a citocina anti-inflamatória Il10 (r2 = 0,762, p< 0,05). No estudo clínico, o tamanho e a concentração das EVs variaram significativamente de acordo com o estágio da doença (p<0.001, p<0.05). A expressão de miR-122 nas EVs foi menor, e a de miR-4758 foi maior, em comparação com suas expressões no soro (p<0.05). MiR-188 e miR-1226 foram expressos exclusivamente no soro (p<0.05). Dentro dos estágios da MASLD, miR-122 aumentou significativamente no soro em comparação com as EVs no grupo Esteatose (p<0.05), sem diferenças nos estágios posteriores. MiR-4758 foi expresso significativamente dentro das EVs em Esteatose e Cirrose (p<0.05), e em HCC, foi expresso exclusivamente no soro (p<0.05). Nos animais MASLD, miR-122 aumentou significativamente em comparação com seus respectivos controles, e o 6 grupo MASLD-28 mostrou um aumento significativo em relação ao MASLD-16 (p<0.001). Além disso, em MASLD-28, miR-122 aumentou significativamente no soro comparado em EVs (p<0.05). Conclusão: As EVs têm um papel na progressão da MASLD, pois estão associadas a citocinas inflamatórias em estágios iniciais e anti-inflamatórias em estágios posteriores em modelos animais, contribuindo para a progressão ou resolução da doença. Além disso, as EVs variam em sua biogênese de acordo com cada estágio da MASLD. Os microRNAs relacionados à doença variam em sua expressão e transporte (dentro das EVs e no soro) dependendo da progressão da doença. Isso nos leva a sugerir que é importante avaliar EVs e microRNAs em conjunto para entender melhor seu papel e sugerir como potenciais biomarcadores da progressão da MASLD. Sabemos que ainda é necessária uma melhor compreensão de sua dinâmica e papel nas diferentes etapas da MASLD, mas este é o primeiro estudo que caracteriza as EVs e o transporte de microRNAs em diferentes estágios da doença. |
