Ligação dos fatores de crescimento semelhantes à insulina durante a diferenciação das células de carcinoma embrionário humano extragonadal (mediastinal) Tera-2

• Ano de defesa: 1993
• Autor(a) principal: Fleck, James Freitas
• Orientador(a): Prolla, João Carlos
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Neoplasias; Somatomedinas; Diferenciação celular
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/197828

As células de carcinoma embrionário humano Tera-2 sofrem diferenciação quando expostas à 2.1 mM alfa-difluorometilornitina (DFMO). As células diferenciadas ligam 2-3 vezes mais [125I] - IGF-II do que as células não-diferenciadas. A ligação de IGF-II foi consideravelmente maior do que de IGF-I tanto em células Tera-2 diferenciadas quanto não-diferenciadas. Análise de ligação competitiva demonstrou que a ligação de [125I] - IGF-II foi efetivamente bloqueada por IGF-II não-marcado, mas não por IGF-I não-marcado, enquanto que a ligação de t125I] - IGF-I foi bloqueada tanto por IGF-I como por IGF-II não-marcados. As células Tera-2 indiferenciadas exibem um modelo de sítio único de ligação tanto para IGF-I (Kd = 1.2 InM, 7.0 x 103 sítios/célula) quanto para IGF-II (Kd = 8.2 ZnM, 3.4 x 105 sítios/célula). As células Tera-2 diferenciadas exibem um modelo de sítio único de ligação para IGF-I (Kd = 1.03nM, 6.7 x 103 sitios/celula) e um modelo de dois sítios de ligação para IGF-II. Células Tera-2 diferenciadas exibem um sítio de ligação de alta afinidade-baixa capacidade (Kdh = 0.31nM, 2.2 x 105 sítios/célula) e um sítio de ligação de baixa afinidade-alta capacidade (Kdh = IS.lnM, 1.6 x IO7 sítios/célula) para IGF-II. Em experimentos de reação de afinidade cruzada [125I] - IGF-I ligou-se quase que exclusivamente ao receptor do tipo I (bandas de 130 kDa e 260 kDa), enquanto que f123!] - IGF-II ligou-se ao receptor tipo II (banda de 250 kDa) ou a uma variedade de proteínas de ligação com baixos pesos moleculares (bandas de 43 kDa, 70 kDa, 95 kDa e 130 kDa). IGF-II nâo-marcada preveniu reaçao cruzada de [123I] - IGF-II a todas as proteínas de ligação, porém, o mesmo não A aconteceu com IGF-I, sugerindo a presença de proteínas de ligação específica para IGF-II. O número aumentado de sítios de ligação específicos para IGF-II observado após diferenciação induzida por DFMO em células de carcinoma embrionário humano Tera-2 ocorreu nos sítios de ligação de baixa afinidade. Esta mudança quantitativa pode representar um aumento no numero das proteínas de ligação específicas para IGF-II. Uma diminuição significativa nos efeitos estimulatórios de IGF-II na captação de timidina-[3H] foi observado após diferenciação induzida por DFMO em células de carcinoma embrionário humano Tera-2. Estes efeitos podem ser explicados pelo número aumentado de proteínas de ligação observado após a diferenciação, que especificamente ligam-se à IGF-II, podendo funcionar como um "sink" fisiológico para o hormônio, diminuindo sua interação com o receptor efetivo para IGF tipo II efetivo.