Exposição embrionária ao etanol induz alterações comportamentais e neuroquímicas em Zebrafish adulto

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Baggio, Suelen
• Orientador(a): Oliveira, Diogo Losch de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Transtornos do espectro alcoólico fetal; Desenvolvimento embrionário; Comportamento animal; Ansiedade; Etanol; Ácido glutâmico; Peixe-zebra
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/213712

As Desordens do Espectro Alcoólico Fetal (Fetal alcohol spectrum disorders – FASD) são um conjunto de desordens neuro-desenvolvimentais, que incluem alterações morfológicas, neuroquímicas e comportamentais. Durante a última década, o zebrafish têm se tornado um excelente modelo para analisar os efeitos, tanto a curto quanto a longo prazos, das formas severas e brandas desta desordem, incluindo possíveis alterações na morfologia cerebral, déficits comportamentais e modificações nos sistemas de neurotransmissão. O objetivo desta tese foi analisar as possíveis alterações comportamentais e neuroquímicas em zebrafish adultos expostos a diferentes concentrações de etanol durante a fase inicial do desenvolvimento. Os embriões (24 horas pós-fertilização) foram expostos, durante duas horas, a diferentes concentrações de etanol (0.1%, 0.25%, 0.5%, e 1%), mimetizando formas brandas da Síndrome alcoólica fetal. Na idade adulta, os animais foram submetidos a análises comportamentais, neuroquímicas e morfológicas. Inicialmente, os animais foram submetidos aos testes comportamentais de exploração ao Tanque novo (Novel tank test) e preferência social. Observamos que a exposição ao etanol em fases iniciais do desenvolvimento induz, de forma concentraçãodependente, uma redução no tempo gasto na zona coespecífica, próxima ao cardume, e alterações significativas na tarefa de Tanque novo (ex.: aumento do tempo no fundo do aparato), sugerindo elevada ansiedade, enquanto, o tratamento com buspirona mostrou que a redução de ansiedade está relacionada com redução no comportamento de cardume. Após, os animais foram mortos e seus cérebros removidos para análises neuroquímicas e histológicas. Os seguintes parâmetros foram avaliados: binding e captação de glutamato, imunoconteúdo de VGLUT2, atividade das enzimas glutamina-sintetase e Na+/K+ ATPase e respirometria de alta-resolução. Outro grupo de animais foi utilizado para preparação de lâminas histológicas e subsequente avaliação da neurodegeneração na região do tálamo. Quanto aos parâmetros neuroquímicos do sistema glutamatérgico, observamos redução na captação de glutamato dependente de Na+ no cérebro de zebrafish adulto, a qual pode ser modulada pelo tratamento com ceftriaxona, através do aumento da expressão do transportador EAAT2. Os grupos de maior concentração de etanol, 0,5 e 1%, apresentaram redução na ligação de glutamato em frações enriquecidas de membrana e diminuição na atividade da enzima Na+/K+ ATPase. Além disso, observamos redução da atividade da enzima glutamina-sintetase no grupo EtOH 1%. A exposição embrionária ao etanol não alterou o imunoconteúdo do transportador vesicular de glutamato VGLUT2, o metabolismo energético mitocondrial, e nem o número de neurônios do tálamo dos animais adultos. Nossos resultados confirmam que a exposição a diferentes concentrações de etanol durante o desenvolvimento leva a alterações comportamentais que persistem até a idade adulta, tais como ansiedade e diminuição da interação social. Quanto aos parâmetros neuroquímicos, a exposição embrionária ao etanol pode levar a alterações na neurotransmissão glutamatérgica no cérebro de zebrafish adulto, contudo, sem alterações nos núcleos anterior, ventrolateral e ventromedial do tálamo destes animais. Concluímos que mesmo a exposição embrionária a baixas concentrações de etanol é capaz de induzir alterações comportamentais e neuroquímicas, que persistem ao longo da vida do indivíduo.