Nanocápsulas de núcleo lipídico e nanopartículas de proteína vegetal fluorescentes : estudo de captação em culturas celulares

• Ano de defesa: 2014
• Autor(a) principal: Asbahr, Ana Carolina Cavazzin
• Orientador(a): Pohlmann, Adriana Raffin
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Nanotecnologia; Nanocápsulas poliméricas; Nanopartículas; Captação celular; Proteína de algodão
• Palavras-chave em Inglês: Lipid-core nanocapsules; Cotton seed protein nanoparticles; Uptake mechanism
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/234287

A captação de nanocápsulas de núcleo lipídico (LNC) e nanopartículas de proteína de algodão (GONP) foi avaliada em células de câncer de mama MCF7. As GONP foram produzidas por reticulação a partir de concentrado proteico de algodão e cloreto de cálcio. O estudo de pré-formulação revelou que o pH inicial e concentração de reticulante interferem no tamanho e polidispersão das partículas, sendo o sistema mais estável obtido em pH 3,0 e 9 mM de CaCl2. As GONP são esféricas, com superfície levemente rugosa, têm pH de 3,91 ± 0,14, potencial zeta de -20,1 ± 0,608 mV, um diâmetro aproximado de 273,8 ± 12,8 nm (Zave) e PdI de 0,168 ± 0,51 por PCS; 191,5 ± 23,3 nm e Span de 1,93 ± 0,29 por DL e 113,7 nm por MET. A análise de MEVEDS confirmou que os componentes majoritários da estrutura são C, Ca e Cl. Cada mL de suspensão possui 7,00 x 1012 ± 0,2477 partículas. O mecanismo de formação das partículas envolve forças hidrofóbicas e reticulação com íons Ca2+ e sua estabilidade é de 48 h. Para os estudos de captação em células MCF7, foram produzidas GONPf fluorescentes com rod123 e LNCf com PCL covalentemente ligada à roB por deposição interfacial do polímero pré-formado. Os estudos de viabilidade celular por MTT revelaram que GONPf não é tóxica para macrófagos RAW 264.7 e células MCF7 entre 0,152 e 3,056x10-2 m2 de superfície aplicada e LNCf, entre 0,157 e 0,785x10-2 m2, com uma DL50 de 1,02x10-2 m2. A captação das partículas foi avaliada após 24 h de incubação a 37°C/5% CO2 e demonstrou ser dose-dependente. As LNCf são captadas por endocitose mediada por caveolina e as GONPf, por um mecanismo misto envolvendo macropinocitose, endocitose dependente de clatrina e endocitose dependente de caveolina. A presença de tensoativo na superfície das LNCf é a causa provável para a menor captação em relação às GONPf.