Redução do volume de percoll para seleção espermática de sêmen sexado na produção in vitro de embriões bovinos

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Missio, Daniele
• Orientador(a): Brum, Daniela dos Santos , Leivas, Fábio Gallas
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal do Pampa
• Programa de Pós-Graduação: Mestrado Acadêmico em Ciência Animal
• Departamento: Campus Uruguaiana
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Bovine; Bovino; Qualidade espermática
• Palavras-chave em Inglês: Percoll gradients; Recovery rate; Sperm quality; Gradientes de Percoll; Taxa de recuperação
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS
• Link de acesso: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/3383

Na produção in vitro de embriões (PIV) bovinos são utilizadas diferentes técnicas de seleção espermática, a fim de recuperar o maior número de espermatozoides com boa qualidade e remover componentes do sêmen e diluente. Dentre essas técnicas, a seleção por gradientes descontínuos de Percoll, é a mais utilizada atualmente em laboratórios de PIV de bovinos. Porém essa técnica vem sendo modificada principalmente com o aumento da utilização do sêmen sexado. O sêmen sexado possui características distintas do sêmen convencional, como baixo número de células por dose e baixa motilidade pós-descongelamento. Assim, o desenvolvimento de um método eficiente para a seleção espermática, que aumente a taxa de recuperação sem prejudicar a qualidade dos espermatozoides é essencial. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do volume de Percoll na recuperação espermática, qualidade dos espermatozoides, estresse oxidativo e cinética do desenvolvimento embrionário de embriões bovinos PIV. Palhetas de sêmen convencional ou sexado foram descongeladas a 35º C por 20 s e distribuídas em alíquotas iguais em três diferentes volumes de Percoll: 300 μL de cada gradiente de Percoll (90, 60 e 30%), Controle; 100 μL de cada gradiente de Percoll, P100; e 200 μL de cada gradiente de viii Percoll, P200. Qualidade espermática, taxa de fecundação e cinética do desenvolvimento embrionário até 48 horas pós-inseminação foram avaliadas. Para o sêmen convencional, a motilidade, o vigor e a taxa de recuperação foram maiores nos tratamentos P100 e P200 comparado ao Controle (P < 0,05), enquanto os níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS), peroxidação lipídica e atividade da enzima superóxido dismutase (SOD) não foram influenciados pelos tratamentos. Para o sêmen sexado, P100 aumentou a velocidade curvilínea, velocidade média da trajetória e amplitude de deslocamento lateral da cabeça (P < 0,05). A taxa de recuperação foi maior em P100 do que no Controle e P200 (P < 0,05). A formação de ROS foi menor em P100 do que em P200 e Controle, e a atividade SOD foi menor em P100 do que no Controle. As taxas de fecundação e clivagem, momento da primeira clivagem e número de células foram similares entre P100 e Controle (P > 0,05). Portanto, o volume de Percoll de 100 μL aumentou a taxa de recuperação espermática sem prejudicar a qualidade dos espermatozoides e desenvolvimento embrionário, permitindo assim, aumentar o número de gotas inseminadas/ dose e diminuir custos.