Caracterização citogenética de espécies de Coccinellidae (Coleoptera) ocorrentes em Viçosa-Minas Gerais

• Ano de defesa: 2001
• Autor(a) principal: Maffei, Eliane Mariza Dortas
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa
• Palavras-chave em Português: Citogenética; Coccinelidae; Coleoptera; Meiose; FISH; Ciências Biológicas
• Link de acesso: http://www.locus.ufv.br/handle/123456789/11013

A família Coccinellidae (Coleoptera) apresenta, aproximadamente, 4.000 espécies. Muitas delas têm sido utilizadas com eficiência tanto em programas de manejo de pragas quanto em estudos relacionados com impacto ambiental, causado por plantas transgênicas. As análises citogenéticas, na família Coccinellidae, espécies, foram sendo que realizadas a maioria somente em, aproximadamente, 4,3% das restringiu-se à descrição do número de cromossomos. Neste trabalho, foram realizadas análises citogenéticas em Eriopis connexa, Olla v-nigrum e Cycloneda sanguinea, visando: 1. adaptar a técnica para obtenção de cromossomos em células mitóticas e meióticas; 2. determinar o número e morfologia dos cromossomos metafásicos por coloração convencional; 3. avaliar o comportamento dos cromossomos durante a meiose, descrevendo o sistema de determinação sexual; 4. caracterizar a distribuição da heterocromatina constitutiva utilizando banda-C, banda HSS (Hot Saline Solution), enzimas de restrição (Msp-I e Hae-III) e fluorocromo (CMA 3 ); 5. aplicar metodologia de banda Ag-NOR para localizar a atividade gênica da região organizadora de nucléolo; 6. mapear, por meio de FISH, os cromossomos carreadores de genes rDNA. O número cromossômico foi 2n=18+XX para fêmeas e 2n=18+Xy para os machos, em todas as espécies. A única espécie que apresentou um cromossomo B eucromático restrito a fêmeas foi E. connexa. A meiose dos machos revelou a meio-fórmula n=9+Xy p , e o modo de associação dos cromossomos sexuais foram do tipo pára-quedas, em todas as espécies. Em C. sanguinea, durante a prófase I (paquíteno), a associação dos cromossomos sexuais ocorreu de maneira ponta-a- ponta linearmente até formar um pseudo-anel. Os resultados das metáfases mitóticas avaliadas por banda NOR, tanto em E. connexa quanto em C.sanguinea , mapearam a região organizadora de nucléolo ativa em um par autossômico. A análise com fluorocromo CMA 3 , realizada em E. connexa, foi consistente com a banda NOR sendo positiva nesta região. Em células meióticas de O. v-nigrum, a região NOR ativa esteve presente na vesícula sexual, sendo confirmada por FISH com genes rDNA. Entretanto, os resultados das análises da mitose e meiose de C. sanguinea , por banda NOR e coloração seqüencial FISH/AgNOR, foram controversos. Os genes ativos localizaram-se em um par autossômico (metáfase espermatogonial), porém a vesícula sexual (prófase I) e o lúmen do pára-quedas (metáfase I) ficaram fortemente impregnados por prata. O FISH mapeou os genes rDNA fora da vesícula sexual. Com base nestes resultados sugeriu-se que essas substâncias sejam proteínas nucleolares, sintetizadas pelo par autossômico e importadas durante a associação dos cromossomos sexuais (prófase I). Tanto em C. sanguinea quanto em E. connexa, a heterocromatina constitutiva avaliada por banda-C, localizou-se principalmente na região pericentromérica de todos os cromossomos. Esta região foi rica em pares de base GC (digerida pela Hae III). Entretanto, alguns blocos de heterocromatina constitutiva (telômeros) não foram digeridos. A banda HSS (Hot Saline Solution) extraiu toda a heterocromatina, sugerindo-se que a heterocromatina seja rica, também, em seqüências repetitivas de bases AT, conferindo, portanto, uma natureza molecular heterogênea. A utilização da enzima Msp-I forneceu resultado negativo.