Purificação parcial, propriedades bioquímicas e cinéticas de α- amilases de populações de Sitophilus zeamais resistentes e susceptível a piretróides
Ano de defesa: | 2008 |
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Autor(a) principal: | |
Orientador(a): | |
Banca de defesa: | |
Tipo de documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Viçosa
BR Bioquímica e Biologia molecular de plantas; Bioquímica e Biologia molecular animal Mestrado em Bioquímica Agrícola UFV |
Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Palavras-chave em Português: | |
Link de acesso: | http://locus.ufv.br/handle/123456789/2416 |
Resumo: | Sitophilus zeamais Motschulsky (Coleoptera: Curculionidae), destaca-se como a principal praga que ataca o milho armazenado causando grandes prejuízos. O controle deste inseto é feito principalmente por inseticidas, sendo que o uso intensivo desses compostos levou à ocorrência de diversos casos de resistência. A expressão da resistência a inseticidas geralmente induzem efeitos deletérios no inseto. Populações de S. zeamais com susceptibilidades distintas a inseticidas podem apresentar maior eficiência na digestão do amido ingerido pela maior atividade de α-amilase em populações resistentes. Isso possibilitaria ao inseto um maior acúmulo de reservas no corpo gorduroso para manutenção de seus aparatos de defesa sem ocasionar prejuízo ao seu crescimento e desenvolvimento. Para obtenção das α-amilases purificadas foram feitas sequencialmente uma precipitação com glicogênio e uma cromatografia de troca iônica. A enzima purificada da população resistente sem custo apresentou uma atividadel de α-amilase semelhante à obtida para a população susceptível e maior em relação à população resistente com custo. O perfil de eluição referente a purificação das enzimas das duas populações resistentes evidenciou a presença de mais de um pico com atividade de α-amilase sugerindo a produção de isoformas com pontos isoelétricos diferentes. As α-amilases purificadas das três populações apresentaram uma massa molecular de 53,7 kDa por SDS-PAGE. A maior atividade em todas as populações foi em pH 5,0, numa faixa de temperatura de 30 a 40°C. O inibidor acarbose e o inibidor proteináceo extraído de trigo se mostraram efetivos em inibir parcialmente as α-amilases, sendo que a α-amilase da população resistente sem custo se mostrou menos vulnerável à inibição. A população resistente sem custo fisiológico associado ao fenômeno da resistência apresentou uma maior atividade e maior produção da enzima quando comparada à população resistente com custo e a população susceptível. A maior produção da enzima estaria possibilitando um maior estoque energético no corpo gorduroso dos insetos permitindo a manutenção dos mecanismos de resistência sem comprometer os demais processos fisiológicos. Dessa forma, os maiores níveis de α-amilase estariam contribuindo para mitigar o custo fisiológico associado aos mecanismos de resistência na população resistente sem custo de S. zeamais. |