Isolamento, purificação e caracterização molecular de bacteriófagos específicos para Escherichia coli causadora de mastite bovina

• Ano de defesa: 2011
• Autor(a) principal: Dias, Roberto Sousa
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa; BR; Análises quantitativas e moleculares do Genoma; Biologia das células e dos tecidos; Mestrado em Biologia Celular e Estrutural; UFV
• Palavras-chave em Português: Mastite bovina; Bacteriófagos; Escherichia coli; Cromatografia; Bovine mastitis, Bacteriophages, Escherichia coli; Chromatography; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL
• Link de acesso: http://locus.ufv.br/handle/123456789/2338

A mastite bovina causa sérios prejuízos tanto ao produtor, quanto à indústria de produtos lácteos. É causada por diversos patógenos, divididos em dois grupos principais: ambientais e contagiosos. Enquanto o número de casos de mastite contagiosa vem diminuindo, os casos causados por patógenos ambientais aumentam, sendo a Escherichia coli o principal agente etiológico. Há um significativo aumento no número de novos casos causados por essa bactéria, sendo atualmente o principal responsável por casos de mastite que culminam com a morte do animal. O surgimento cada vez mais freqüente de linhagens multidroga resistentes e altamente patogênicas torna necessário o estudo de alternativas ao uso da antibioticoterapia. Assim os bacteriófagos, vírus que infectam bactérias e são altamente específicos, surgem como uma opção viável devido principalmente ao baixo custo e a rapidez com que é possível isolar um novo fago específico a linhagens resistentes. Estudos recentes da genética dos fagos e bacteriana tornam mais seguro o uso da fagoterapia, o que torna necessário estudos moleculares, visando obter dados com relação a possível utilização dos mesmos na fagoterapia. Neste contexto, foram isolados 15 bacteriófagos específicos para linhagens de Escherichia coli isoladas em rebanhos acometidos pela mastite bovina. Os isolados foram caracterizados com relação ao seu perfil protéico, evidenciando a presença de 2 proteínas de baixo peso molecular, composição genômica de DNA dupla fita com cerca de 44 kb. Com o objetivo de reduzir os custos e o tempo na obtenção de suspensões com alto grau de pureza, foi padronizada uma metodologia de purificação por cromatografia de troca iônica em um sistema FPLC, sendo possível a obtenção de suspensões virais com grau de pureza apreciável.