Cultivo in vitro e transformação de soja visando o silenciamento da oleoil dessaturase por RNAi.

• Ano de defesa: 2014
• Autor(a) principal: Lopes, Flávio Santos
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa; BR; Genética animal; Genética molecular e de microrganismos; Genética quantitativa; Genética vegetal; Me; Doutorado em Genética e Melhoramento; UFV
• Palavras-chave em Português: Soja - Melhoramento genético; Células - Transformação; Cultivo in vitro; Engenharia genética; Ácidos graxos; Soy - Breeding; Cells - Transformation; Cultivation in vitro; Genetic engineering; Fatty acids; CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS
• Link de acesso: http://locus.ufv.br/handle/123456789/1395

Este estudo teve como objetivo avaliar o desenvolvimento in vitro de plântulas de soja obtidos a partir de eixos embrionários crescidos sob diferentes condições e realizar a transformação de eixos embrionários imaturos para silenciar o gene oleoíl dessaturase usando RNA de interferência. Os resultados demonstram que as concentrações dos componentes do meio de cultivo (sais, sacarose , agentes de gelificantes) e as variações de pH afetam o desenvolvimento inicial do eixo embrionário de soja, o que sugere que estas adaptações sejam genótipo-específicas. O ensaio troca gasosa em presença de sacarose mostraram que a oferta de sacarose deu suporte para o desenvolvimento in vitro dos eixos embrionários de soja. Além disso, as plântulas cultivadas em recipientes com membranas alternativas (preparadas com um filme de politetrafluoroetileno e três camadas de fita micropore) apresentaram desenvolvimento semelhante ao das plântulas cultivadas em frascos com membranas comerciais (MilliSeal® AVS -045 Air Vent), tendo como vantagem o baixo custo . Durante o ensaio de transformação, para a descontaminação de vagens imaturas, foi usando um tratamento adaptado da descontaminação de sementes de soja. As estratégias utilizadas neste estudo permitiu uma obtenção de 29 plantas aclimatizadas. Sete plantas destas apresentando produtos de amplificação com o tamanho esperado (421 pb), evidenciando a transformação. Entre estas, quatro plantas produziram sementes. O protocolo baseado em transformação do eixo de embrionário imaturo proporcionou uma eficiência de transformação 1,3-2,6 %.