Caracterização in silico de genes da biossíntese de lipídeos e utilização de eixos embrionários e nós-cotiledonares na transformação genética de soja

• Ano de defesa: 2012
• Autor(a) principal: Sousa, Cassiana Severiano de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa; BR; Bioquímica e Biologia molecular de plantas; Bioquímica e Biologia molecular animal; Doutorado em Bioquímica Agrícola; UFV
• Palavras-chave em Português: Eixos embrionários; Soja; Nós-cotiledonares; Embryonic axes; Soybean; Cotyledonary nodes; CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIA::FITOTECNIA::MELHORAMENTO VEGETAL
• Link de acesso: http://locus.ufv.br/handle/123456789/312

As atividades das enzimas oleoil dessaturase, 1,2-diacilglicerol colinafosfotransferase (CPT) e a lisofosfatidilcolina aciltransferase (LPCAT) regulam a biossíntese de lipídeos em plantas. Dessa forma, um melhor conhecimento dos genes que codificam essas enzimas é importante no processo de melhoramento genético da qualidade do óleo de soja. O objetivo do presente trabalho foi caracterizar in silico os genes que codificam as enzimas CPT e LPCAT em soja e avaliar a utilização de eixos embrionários e nós-cotiledonares como explantes em protocolos de cultura de tecidos para transformação genética, via RNA de interferência, com cassetes de silenciamento do gene da oleil dessaturase. Análises computacionais mostraram que o genoma da soja apresenta dois genes que codificam a CPT e dois genes que codificam a LPCAT, sendo que um desses genes apresentou um transcrito alternativo. Nas regiões promotoras foram identificados cis-elementos responsáveis pela expressão semente-específica e também de resposta a estresses biótico e abiótico. A análise in silico indica que os genes são expressos em diferentes condições de estresse, em embriões somáticos em diferenciação, em sementes imaturas, em tecidos de raiz e em calos. A análise das sequências aminoacídicas revelou a presença de domínios transmembrana e a busca da localização celular indicou que as enzimas CPT e LPCAT estão localizadas no retículo endoplasmático. Como esses genes se expressam em sementes, eles são possíveis candidatos à manipulação genética visando a melhoria da qualidade do óleo. Dois protocolos de transformação de soja foram avaliados para a possível obtenção de soja com óleo que apresente maior estabilidade oxidativa. Nesse sentido, as variedades comerciais CAC-1 (de ciclo tardio) e CD-201 (de ciclo precoce) foram submetidas à infecção via Agrobacterium tumefaciens da linhagem KYRT1. O protocolo utilizado para os eixos embrionários foi mais rápido, com meios de cultura menos elaborados em relação à composição e um maior número de plantas foi transferido para a casa de vegetação, onde permaneceram até a produção de vagens e sementes. Foi possível realizar todas as etapas, desde a infecção até regeneração e aclimatação das plantas, para as variedades utilizadas, pelos protocolos descritos.