O papel da Ezrina e do receptor B2 adrenérgico (B2AR) na replicação viral em células T CD4+ infectadas pelo HIV-1

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Andrade, Tatiane Montes de [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: HIV-1; Ezrina; Receptor β2 adrenérgico; Células T CD4+; Jurkat
• Link de acesso: https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/66504

Durante as duas últimas décadas, muitos estudos tiveram como objetivo entender a interação entre o Sistema Nervoso Simpático e o Sistema Imunológico e como a desordem desta relação poderia impactar na patogênese ou curso de patologias. Pacientes com altos níveis de noradrenalina são considerados como piores controladores de viremia relacionada ao HIV-1 quando comparados a pacientes com níveis normais. Os β2ARs são expressos na superfície celular e interagem com proteínas locais, como proteínas de membrana, filamentos de Actina do córtex celular e a “proteína ligante 50 de Ezrina-Radixina-Moesina” (EBP50). Esta dissertação teve como objetivo investigar o envolvimento da Ezrina na replicação viral de células T CD4+ da linhagem Jurkat infectadas pelo HIV-1. Células T CD4+ da linhagem Jurkat foram cultivadas, silenciadas quanto à expressão pós transcricional de Ezrina por oligonucleotídeos anti-senso e infectadas por HIV-1. Em todos os experimentos realizados, sobrenadantes e pellets celulares foram coletados. Sobrenadantes para quantificar o RNA viral por RT-qPCR (carga viral) e pellets celulares para quantificar a expressão relativa de β2ARs por qPCR e para a verificação da expressão proteica de β2AR e Ezrina em extratos proteicos por Western Blot. A expressão proteica de Ezrina é significativamente reduzida em células T CD4+ da linhagem Jurkat em momentos iniciais da infecção pelo HIV-1. Células da linhagem Jurkat cuja expressão pós transcricional de Ezrina foi silenciada produzem um número elevado vRNA. O mesmo tipo celular apontado quando infectado e tratado com agonistas da via adrenérgica apresenta níveis reduzidos de carga viral.