Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2011 |
| Autor(a) principal: |
Barbosa, Paula Peraro [UNIFESP] |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Dissertação
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/9188
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Resumo: |
Duas amostras clínicas de S. marcescens resistentes aos carbapenens foram isoladas em 2005 de dois pacientes hospitalizados no Hospital Universitário Pedro Ernesto (Rio de Janeiro). A tipagem molecular por PFGE revelou que os isolados eram genotipicamente idênticos. O teste de sensibilidade por microdiluição em caldo confirmou a resistência dos isolados de S. marcescens aos carbapenens. Adicionalmente, estes isolados apresentaram resistência à ticarcilina, à ceftazidima, à gentamicina, ao ácido nalidíxico e à ciprofloxacina; porém, apresentaram sensibilidade à cefepima e ao aztreonam. Ambos apresentaram teste de hidrólise do imipenem positivo, e os amplicons blaGES e blaOXA-10 foram identificados por PCR e sequenciamento. Uma nova variante GES, apresentando as substituições Gly170Ser, responsável pela atividade carbapenemase, e Gln43Glu em relação à GES-1, foi identificada e nomeada GES-16. BlaGES-16 estava inserido em um integron de classe 1 que possui um promotor fraco, um gene codificador da integrase truncado, e uma região variável composta pelos seguintes cassetes gênicos: catB3 truncado, blaGES-16, dfr22, aac(6')-IIc e aadA1. Ensaios de hibridização sugeriram a localização plasmidial de blaGES-16, posteriormente confirmada pela obtenção de transformantes. No entanto, o plasmídeo de cerca de 30 Kb contendo blaGES-16 não apresentou capacidade conjugativa. A expressão de blaGES-16 clonado em E. coli TOP10, bem como a transferência do plasmídeo carreador de blaGES-16 para esta cepa, confirmaram a elevação das CIMs dos β-lactâmicos, incluindo carbapenens. GES-16 apresentou pI igual a 5,6. Ensaios de cinética enzimática utilizando GES-16 purificada demonstraram sua atividade sobre as penicilinas, as cefamicinas, as cefalosporinas de amplo espectro e os carbapenens, mas não sobre o aztreonam. Ainda, demonstraram que GES-16 é inibida pelo ácido clavulânico, pelo tazobactam, e em menor grau pelo imipenem. O presente estudo identificou uma nova variante de GES com atividade carbapenemase em Enterobacteriaceae no Brasil |
