Avaliação da associação entre S- nitroso- N- acetil -DL- penicilamina e cloreto férrico na indução da morte celular imunogênica em linhagem celular de câncer colorretal humano

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Almeida, Víctor Turco de [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: ATP; Calreticulina; Células tumorais; HMGB1; Óxido nítrico; SNAP
• Link de acesso: https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/67418

Agentes quimioterápicos, embora sejam eficazes na eliminação de determinados tipos de tumores, dependendo da concentração, podem causar citotoxicidade contra células não tumorais e severos efeitos colaterais. Novas estratégias de tratamentos mais eficientes e específicos se mostram necessárias frente a estes desafios. A indução da morte celular imunogênica (MCI) em células tumorais por alguns quimioterápicos é uma alternativa viável. A MCI é caracterizada pela externalização e liberação de padrões moleculares associados ao dano (DAMPs), como a proteína calreticulina (CRT), que é translocada do retículo endoplasmático (RE) para a membrana plasmática (MP) e externalizada para a porção extracelular. Além disso, há a liberação da proteína nuclear de alta mobilidade B1 (HMGB1) e do nucleotídeo adenosina trifosfato (ATP) para o meio extracelular. O quimioterápico Oxaliplatina (OXP) é capaz de induzir MCI. O doador de óxido nítrico (NO), nitroprussiato de sódio (SNP), um complexo Ferro-nitrosil, é capaz de promover a translocação e externalização de CRT e induzir a MCI. Assim, propusemos que outro doador de NO, o S-nitrosotiol, S- nitroso- N- acetil- DL- penicilamina (SNAP) em combinação com cloreto férrico (SNAP + FeCl3), pudesse fazer o mesmo. Inicialmente, investigamos nestas células a possibilidade de que a OXP, SNP e SNAP + FeCl3 poderiam alterar as expressões dos mRNA codificadores para as proteínas do metabolismo de ferro, o receptor de Transferrina (TFRC) e as cadeias leve (FTL) e pesada (FTH1) da Ferritina e assim promover a MCI. Nossos resultados não mostraram alterações importantes nos níveis de expressão dos mRNA codificadores para as proteínas analisadas. Investigamos então a possibilidade de que a OXP, SNP e SNAP + FeCl3 pudessem atuar diretamente sobre as células SW480 e promover a externalização dos DAMPs associados a MCI, mencionados acima. Nossos resultados evidenciaram que OXP e a associação SNAP + FeCl3 não promoviam perda de viabilidade nem induziam morte por apoptose/necrose durante os períodos de tratamento das células. Os dois tratamentos foram capazes de promover a translocação da CRT para o citoplasma e para a MP das células SW480. Ambos os tratamentos promoveram uma diminuição da expressão de HMGB1 nestas células, sugerindo que HMGB1 possa ter sido liberada para o meio extracelular. Por fim, estes tratamentos também promoveram liberação de ATP para o meio extracelular. Concluímos nossas observações sugerindo que compostos como OXP, SNP e a associação SNAP + FeCl3 por apresentarem em sua composição metais de transição são capazes de induzir um estresse oxidativo moderado que por sua vez pode promover a externalização e liberação de DAMPs associados a MCI.