Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2007 |
| Autor(a) principal: |
Costa, Cátia Marques da
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| Orientador(a): |
Fonseca, Adivaldo Henrique da
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| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
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| Departamento: |
Instituto de Veterinária
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: |
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| Palavras-chave em Inglês: |
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| Área do conhecimento CNPq: |
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| Link de acesso: |
https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/9638
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Resumo: |
Anaplasma marginale (Ricktsialles: Anaplasmataceae) é uma riquetsia intraeritrocítica, responsável por ocasionar grandes perdas econômicas na pecuária bovina das regiões tropical e sub-tropical. O objetivo desse trabalho foi produzir as proteínas de membrana recombinantes AM254, VirB9 e VirB10 e avaliar sua possível antigenicidade. Os genes am254, virB9 e virB10 foram submetidos a vários procedimentos experimentais até serem ligados ao plasmídeo pET-47b(+). Após a certificação do plasmídeo recombinante (pET-47bam254, pET-47b-virB9 e pET-47bvirB10) este foi transformado em E. coli Rosetta para expressão. As proteínas recombinantes produzidas foram analisadas pelo ensaio Western blot onde foi observada a reação do anticorpo monoclonal anti-histidina contra rVirB9 (31kDa), rVirB10 (60kDa) e rAM254 (47kDa). Após a confirmação da produção das proteínas recombinantes realizou-se a padronização do ensaio de imunoadsorção enzimática (ELISA) indireto com soros oriundos de sangue total previamente confirmados por PCR; os mesmos soros também foram testados por ELISA (rMSP1 e rMSP5). As médias das densidades ópticas (DO) dos soros positivos foram de 1,339; 1,288 e 1,240 e dos soros negativos de 0,470, 0,324 e 0,414 para AM254, VirB9 e VirB10 respectivamente com diferença significativa ao nível de 5% entre positivos e negativos para cada proteína recombinante. O estudo demonstrou que as proteínas rAM 254, rVirB9 e rVirB10 de A. marginale são reconhecidas por soros de bovinos imunizados com diferentes isolados brasileiros da riquétsia (homólogo e heterólogos), revelando o potencial antigênico dessas proteínas. |
