Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2018 |
| Autor(a) principal: |
Haas, Cristina Sangoi |
| Orientador(a): |
Gasperin, Bernardo Garziera |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Pelotas
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Veterinária
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| Departamento: |
Faculdade de Veterinária
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: |
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| Área do conhecimento CNPq: |
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| Link de acesso: |
http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/7980
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Resumo: |
Fatores produzidos no ovário, como os membros da família dos fatores de crescimento transformantes beta (TGFβ) e seus receptores, exercem papel essencial durante a divergência folicular e ovulação. Interações entre ligantes e seus receptores estão envolvidas em distintas funções ovarianas sob condições fisiológicas ou patológicas. Em especial os fatores produzidos pelos oócitos como a proteína morfogenética óssea 15 (BMP15) e o fator de crescimento e diferenciação 9 (GDF9), desempenham papéis importantes na regulação das funções ovarianas como crescimento e diferenciação folicular. Entretanto, grande parte do conhecimento sobre esses fatores tem sido obtido em modelos in vitro ou através da observação de mutações espontâneas em ovelhas e, apesar da grande relevância, a função destes na fisiologia ovariana ainda é pouco conhecida. Além disso, o papel do sistema TGFβ na modulação do processo de regressão do corpo lúteo ainda não foi investigado nas espécies domésticas. Neste contexto, esta tese apresenta uma série de estudos acerca da participação de membros da família TGFβ, em especial das BMPs, na regulação de eventos ovarianos envolvendo o crescimento folicular final, ovulação, formação do corpo lúteo e luteólise. O primeiro estudo trata-se de uma revisão que teve por objetivo reunir a informação disponível na literatura sobre o tema. Posteriormente, um segundo estudo objetivou investigar o nível de transcritos de membros da família TGFβ e seus receptores durante a luteólise induzida in vivo. Foram utilizadas amostras de corpos lúteos bovinos coletados in vivo nos momentos 0, 2, 12, 24 e 48 h após a administração de uma dose de PGF2α no dia 10 do ciclo estral. Os níveis de RNAm de BMP4, BMP6 e INHBA foram regulados positivamente às 2 h após a administração de PGF2α (P<0,05) em comparação com 0 h. A expressão relativa de RNAm de BMP2, BMP4, ACVR1B, INHBA e INHBB foi regulada positivamente 12 h após a aplicação de PGF2α (P<0,05), enquanto que o TGFBR3 teve uma regulação negativa às 48 h. Coletivamente os dados demonstram que os RNAm de membros da família TGFβ são regulados pelo tratamento com PGF2α, sugerindo um envolvimento no processo de luteólise funcional e morfológica em bovinos. Em um terceiro estudo, objetivou-se determinar o efeito da injeção intrafolicular da BMP15 sobre o crescimento folicular final e ovulação/luteinização. Ainda, avaliou-se o efeito do tratamento com gonadotrofinas em células da granulosa cultivadas in vitro, sobre o nível de transcritos dos receptores da BMP15. Foi realizada a injeções intrafoliculares de BMP15rh nas concentrações de 100 ng/mL, em folículos dominantes, e de 500 ng/mL, em folículos pré-ovulatórios. Os resultados da injeção intrafolicular de BMP15rh demonstram uma tendência (P=0,09) de inibição do crescimento folicular. Já os resultados em folículos pré-ovulatórios suportam a hipótese de um efeito inibitório sobre o crescimentofolicular e ovulação, sem inibir a luteinização. Folículos tratados com BMP15 não ovularam e deram origem a estruturas císticas luteinizadas, o que foi confirmado através de dosagens de progesterona sérica. No cultivo das células da granulosa in vitro, a expressão de RNAm de BMPR2 e BMPR1B não foi alterada pelo tratamento com LH ou FSH. Conclui-se que o tratamento com BMP15 inibe o desenvolvimento folicular e a ovulação, induzindo à luteinização e formação de cistos em bovinos. Estudos moleculares futuros são necessários para elucidar os mecanismos de ação da BMP15. Um quarto estudo foi conduzido com o objetivo de validar um método de coleta in vivo de células da granulosa bovinas, para estudos de expressão gênica. Foram testados seis protocolos distintos de separação das células após a coleta, buscando a forma mais adequada para a extração do RNA, sem interferência de outras células eventualmente presentes nas amostras. A partir dos resultados sugerese que o tratamento dos pellets celulares obtidos após aspiração folicular com tampão de lise de eritrócitos possibilita uma melhor qualidade de RNA. Com um protocolo adequado de processamento das células, pode-se dar continuidade à investigação dos efeitos dos fatores foliculares nas células da granulosa in vivo. Coletivamente, os estudos acima descritos, além da gerar conhecimento básico para compreensão do papel dos fatores locais na fisiologia ovariana, podem contribuir no entendimento de processos patológicos e no desenvolvimento de tecnologias que tenham por finalidade a contracepção ou aumento da taxa ovulatória. |
