Tecnologia de phage display aplicada para o controle da leishmaniose tegumentar: identificação de biomarcardores e aplicação como vacinas contra a doença

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Gerusa Brandão de Carvalho
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais; Brasil; MEDICINA - FACULDADE DE MEDICINA; Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde - Infectologia e Medicina Tropical; UFMG
• Palavras-chave em Português: Leishmaniose tegumentar; phage display; resposta imune; células mononucleares do sangue periférico; vacina; mimotopos; Leishmaniose Cutânea; Técnicas de Visualização da Superfície Celular; Imunidade nas mucosas; Leucócitos Mononucleares; Vacinas; Dissertação Acadêmica
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/38775

As leishmanioses compreendem um espectro de doenças encontradas em regiões tropicais e subtropicais do mundo, e que podem causar elevada mortalidade e morbidade. A prevenção e o controle da doença são importantes, porém, apresentam limitações devido à dificuldade na interrupção do ciclo do vetor, à toxicidade dos medicamentos e à ausência de vacinas efetivas. Portanto, a melhoria da profilaxia contra a doença é uma necessidade, e a utilização de novas tecnologias, como Phage Display, pode proporcionar o alcance de tais objetivos. No presente estudo, bacteriófagos expressando mimotopos específicos para anticorpos IgG de pacientes com leishmaniose tegumentar (LT) foram selecionados e testados em experimentos in vitro para a estimulação de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de pacientes com LT tratados e não tratados, bem como de indivíduos sadios, a fim de se avaliar a produção de interferon-γ (IFN-γ) e interleucina-4 (IL-4) nas culturas in vitro e definir os melhores candidatos a serem testados em modelo murino. Os clones foram avaliados quanto à seletividade e especificidade, sendo que os clones A4 e A8 foram selecionados por apresentar maiores valores e utilizados em protocolos de imunização de camundongos BALB/c para avaliação da proteção induzida contra a infecção com Leishmania amazonensis. Os resultados mostraram uma resposta Th1 polarizada gerada após a vacinação com os clones, baseando-se em níveis significativamente maiores de IFN-γ, IL-2, IL-12, fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e fator estimulante de colônias de granulócitos-macrófagos (GM-CSF), além da produção de anticorpos do isotipo IgG2a. Os camundongos vacinados apresentaram reduções significativas da carga parasitária no tecido infectado e órgãos avaliados, quando comparados aos grupos controle. Em conclusão, a tecnologia de phage display foi utilizada para identificar novos clones de fagos expressando peptídeos de interesse, que foram capazes de induzir um perfil de resposta Th1 em PBMCs de pacientes com LT e indivíduos saudáveis, bem como eficazes em induzir proteção em camuindongos BALB/c contra a infecção causada por L. amazonensis.