Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2022 |
Autor(a) principal: |
Campos, Guilherme de Paula
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Orientador(a): |
Oliveira, Marcone Augusto Leal de
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Banca de defesa: |
Silva Filho, Ademar Alves da
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Siebert, Diogo Alexandre
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Tipo de documento: |
Dissertação
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-graduação em Ciências Farmacêuticas
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Departamento: |
Faculdade de Farmácia
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: |
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Área do conhecimento CNPq: |
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Link de acesso: |
https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/14361
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Resumo: |
A eletroforese capilar destaca-se como uma das técnicas analíticas mais promissoras devido ao seu caráter automatizado e confiável, além de ser uma técnica de separação flexível, precisa, altamente eficiente e requerer apenas pequenas quantidades de amostra para análise. Assim, a eletroforese capilar também foi reconhecida como uma técnica adequada para estudar reações enzimáticas e de radicais, incluindo a atividade de inibição enzimática de extratos de produtos naturais e fitoquímicos. Neste trabalho, aplicamos três métodos estabelecidos usando eletroforese capilar para analisar a capacidade de extratos de Baccharis crispa por maceração com etanol a 70% e etanol a 96% durante 5 dias, que possam inibir as enzimas acetilcolinesterase e α-glicosidase, e que também possam desempenhar atividade antinitrosante e antioxidante. No teste antinitrosante, foi avaliada a capacidade dos extratos em capturar as espécies nitrosantes, observando sua presença nos eletroferogramas. Para esta análise, nitrito, nitrato e tiocianato foram usados como uma mistura de padrões. A avaliação da atividade antinitrosante consiste na captura do nitrito pela amostra, reduzindo sua concentração inicial. O teste antioxidante foi realizado utilizando o radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e quercetina como padrão antioxidante. Nesta análise, observou-se a área do pico do DPPH que representa a quantidade capturada pela amostra e pelo padrão interno. Para a análise da inibição das duas enzimas, a reação dos extratos com as mesmas ocorreu no interior do capilar através de múltiplas injeções. A quantidade de produto final dos substratos de cada enzima, permitiu calcular a capacidade de inibição dos extratos. Neste estudo, demonstramos a utilidade da eletroforese capilar como ferramenta para a avaliação das propriedades farmacológicas de plantas medicinais, utilizando a Baccharis crispa, e relatamos que é possível utilizar diferentes modos de eletroforese capilar como ferramenta de análise de reações e atividade inibitória. Além disso, a eletroforese capilar apresenta vantagens como redução da quantidade de solventes, amostras e padrões utilizados, tempo de análise reduzido e automação. No desenvolvimento da atividade antinitrosiva, não foi possível utilizar os extratos macerados devido à interferência do metanol utilizado na diluição dos resíduos e por isso optou-se em utilizar a infusão como método de extração. Nesta análise houve 27,19% de captura do nitrito pela infusão. As amostras extraídas com etanol a 70% e 96% na concentração de 1 mg L, obtiveram capacidade antioxidante de 50,30% (equivalente a 34,84mg de quercetina por grama de extrato) e 42,22% (equivalente a 28,29mg de quercetina por grama de extrato) respectivamente quando incubadas e 58,40% (equivalente a 29,7,0mg de quercetina por grama de extrato) e 38,98% (equivalente a 18,71mg de quercetina por grama de extrato) respectivamente com incubação. Nas análises de reações enzimáticas, a enzima acetilcolinesterase foi inibida em 7,80% pelo extrato de maceração a 70% e 6,89% com o extrato de maceração a 96%. A enzima α−glicosidase foi inibida em 0,51% pelo extrato de maceração a 70%, porém o extrato de maceração a 96 não foi capaz de apresentar atividade inibitória para esta enzima. Neste estudo podemos observar a versatilidade de diferentes métodos empregando a eletroforese capilar para analisar três tipos de atividades, juntamente com as vantagens que esta técnica pode proporcionar. |