Extração, caracterização, atividade antitrombótica e o efeito na síntese de Heparan Sulfato Endotelial de Dermatan sulfato de diferentes origens.
Ano de defesa: | 2022 |
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Autor(a) principal: | |
Orientador(a): | |
Banca de defesa: | , |
Tipo de documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas: Imunologia e Doenças Infecto-Parasitárias/Genética e Biotecnologia
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Departamento: |
ICB – Instituto de Ciências Biológicas
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: | |
Área do conhecimento CNPq: | |
Link de acesso: | https://doi.org/10.34019/ufjf/di/2022/00009 https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/14018 |
Resumo: | Dermatam sulfato (DS) é um polissacarídeo, linear e estruturalmente complexo pertencente à classe dos glicosaminoglicanos (GAG), encontrado em uma ampla variedade de tecidos, estando em muitas espécies ligadas a uma proteína central como proteoglicanos (PG). Os DS-PGs têm sido implicados em vários processos celulares e interações das células com a matriz extracelular. As cadeias DS também podem influenciar o processo de coagulação, ligando-se às proteínas séricas e inibindo a trombina, pela interação com o cofator II da heparina (HCII). Este estudo teve como objetivo extrair GAGs de diferentes tecidos e investigar os efeitos do DS na hemostasia. Os GAGs foram extraídos por proteólise, precipitados, dessalinizados, liofilizados, submetidos à caracterização preliminar através de eletroforese em gel de agarose e dosagens químicas (hexosamina, ácido urônico). GAGs de pele suína (PS) e córnea bovina (BC) foram, ainda, purificados por cromatografia de troca aniônica e caracterizados por eletroforese em gel de agarose, massa molecular, quimicamente (hexosamina, ácido urônico e conteúdo de sulfato) e espectroscopicamente (IR, RAMAN e RMN). Os polissacarídeos purificados foram avaliados em modelos experimentais de animais para trombose e na estimulação da síntese de proteoglicanos de heparam sulfato por células endoteliais em cultura. Diferentes GAGs podem ser extraídos de vários tecidos com alto rendimento. Os polissacarídeos purificados de CB e PS têm uma estrutura polimérica distinta. O BC-DS apresentou a maior massa molecular e menor razão sulfato:hexosamina (DS-BC = 0,802, DS-PS = 1,189), este também parece ter o maior teor de IdoA quando comparado com PS-DS (GlcAC /HEX: DS -BC = 0,619, DS-PS = 1,109). Embora a análise espectroscópica dos carboidratos purificados tenha mostrado espectros semelhantes, é possível encontrar algumas diferenças sutis que podem ser influenciadas pelo ambiente químico em cada uma de suas estruturas poliméricas. Nenhum outro contaminante foi identificado nas amostras. DS-CB e DS-PS mostraram efeitos semelhantes na coagulação, com DS-CB cessando a formação de trombos com uma dose mais baixa (50 µg / g) em comparação com DS-PS (75 µg /g). Ambos os GAGs foram capazes de estimular a síntese de HS-PG endotelial secretado para o meio. Destacamos os achados sobre as propriedades antitrombóticas do DS de PS e BC, e apresentamos um novo resultado em relação às suas propriedades na parede celular endotelial, estimulando a síntese de HS, que foram encontrados para promover respostas angiogênicas das células endoteliais além de suas propriedades antitrombóticas. |