PAPEL DA VITAMINA C, ARGININA E ÓXIDO NÍTRICO NA REGULAÇÃO DE CANAIS DE CÁLCIO E ATIVIDADE DA AKT EM CULTURA DE CÉLULAS DA RETINA

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Silva, Aline Teixeira Duarte
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Vitamina C; Arginina; Óxido nítrico; Canais de cálcio; AKT; Sinalização celular; Vitamin C; Arginine; Nitric oxide; Calcium channels; Celular signaling
• Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/36404

Vitamina C e óxido nítrico são importantes neuromoduladores do sistema nervoso, agindo em muitas vias de sinalização e modulando respostas celulares. Cálcio também é um importante mensageiro celular envolvido em muitos mecanismos de sinalização intracelular como em processos de transcrição gênica, excitabilidade celular e produção de ATP. Utilizando sondas fluorescentes, este trabalho mostra que a vitamina C é capaz de promover o acúmulo de glutamato extracelular levando a ativação da AKT, de maneira dependente de receptores ionotrópicos de glutamato, cálcio e óxido nítrico como já havia sido mostrado anteriormente. O cálcio pode iniciar seus sinais ligando-se a proteínas como a calmodulina, ativando quinases dependentes de calmodulina, incluindo óxido nítrico sintases (NOS). O NO é produzido a partir da L-arginina em uma reação catalisada pela NOS. Neste trabalho mostramos que os níveis de cálcio intracelular aumentaram fortemente após estimulação com L-arginina. Este efeito foi dependente da concentração e atingiu o pico de 1 mM e foi inibido pelo inibidor da NOS, 7-Nitroindazol e pelo inibidor do canal de cálcio tipo L, Nifedipina. Além disso, os dados mostram a participação da via clássica do NO nesse efeito, uma vez que o ativador da guanilil ciclase YC-1 também é capaz de promover aumento sustentado dos níveis de cálcio, e o inibidor da quinase dependente de cGMP (PKG), KT5823, bloqueia o aumento dos níveis de cálcio intracelular desencadeado tanto pela L-arginina quanto pelo YC-1. Em experiências de western blot, dados anteriores mostram que a L-arginina estimula a fosforilação da AKT de uma forma dependente das vias clássicas NO/cGMP/PKG e PI3K. Sugerimos um modelo no qual a L-arginina aumenta a produção de NO e a estimulação de PKG que então modula os canais de cálcio do tipo L em cavéolas, regiões específicas da membrana, permitindo o aumento do influxo de cálcio, a ativação da quinase tipo II dependente de calmodulina e a estimulação de vias a jusante, incluindo PI3K/AKT.