Caracterização do perfil clínico-epidemiológico de uma população com hanseníase na Bahia e avaliação de microRNAs (miRNAs) ligados à via dos TLRs e sua correlação com genes de morte celular em biópsias de pacientes com hanseníase

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2023
Autor(a) principal: Farias, Lucas de Oliveira Neves de lattes
Orientador(a): Castellucci, Léa Cristina lattes, Machado, Paulo Roberto Lima lattes
Banca de defesa: Castellucci, Léa Cristina lattes, Takenami, Iukary Oliveira lattes, Schriefer, Nicolaus Albert Borges lattes
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal da Bahia
Programa de Pós-Graduação: Pós-Graduação em Ciências da Saúde (POS_CIENCIAS_SAUDE) 
Departamento: Faculdade de Medicina da Bahia
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/38139
Resumo: Introdução: A hanseníase é uma doença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium leprae. Cerca de 30-40% dos pacientes desenvolvem episódios inflamatórios súbitos e agudos, as chamadas reações hansênicas. Estudos anteriores mostraram uma série de miRNAs associados aos fenótipos da hanseníase, evidenciando o papel desse mecanismo epigenético na patogênese da doença. Objetivo: Esse trabalho teve como objetivos avaliar a correlação de miRNAs previamente associados à hanseníase com genes ligados à apoptose e autofagia em lesões de pacientes com hanseníase, comparar o padrão de expressão dos genes em biópsias de pacientes com e sem reações e descrever o perfil clínico e epidemiológico de pacientes com hanseníase, atendidos em centros de referência do estado da Bahia, HUPES-AMN e ICOM. Métodos: Biópisas de 28 pacientes com e sem reações hansênicas, com as diversas formas clínicas da hanseníase foram recrutados. Para fins de análise, estes pacientes foram alocados de acordo com a classificação da OMS como paucibacilares (PB) ou multibacilares (MB), e separados em pacientes com ou sem reações. Foram utilizadas amostras de RNA contidas em nosso biorepositório, extraídas pelo método do utilizandoTRIzol® Reagente (Ambion®). A obtenção de DNA complementar (cDNA) foi realizada utilizando o kit comercialmente disponível High Capacity (ThermoFisher). Os genes foram escolhidos por serem importantes em processos de morte celular e serem regulados pelos miRNAs previaente analisados pelo grupo. Expressão gênica pelo método de qPCR em tempo real por TaqMan® foi realizada e os dados analisados comparando-se o ciclo limiar (Ct) entre grupos de amostras. A análise de correlação entre genes e miRNAs foi realizada por meio do teste de Correlação de Spearman, utilizando GraphPad Prism8. As diferenças foram consideradas significativas quando o valor de p ficou abaixo de 0,05 (p ˂ 0,05). O banco de dados clínico-epidemiológico dos pacientes foi analisado através do programa R para Windows, versão 4.2.3 e os dados apresentados por tabelas. Resultados: Foi avaliado por qPCR a expressão dos genes ATG12, TNFRSF10A, PARK2, BCL2, CFLAR e STX7 e comparada a expressão entre pacientes sem reação (PB + MB) e pacientes com reação, (RR e ENH) e não houve associação estatisticamente significante nesta comparação. Nossos resultados mostraram uma correlação entre os miRNAs e os genes ATG12 (miR-125a-3p), TNFRSF10A (miR-146b-5p), PARK2, CFLAR e STX7 (miR-132-5p). Na análise epidemiológica, observamos que a forma MB é mais predominante no sexo masculino e que formas doença dentro deste espectro são mais propensas ao desenvolvimento de reações, assim como atinge pacientes com menor nível educacional e econômico. Conclusão: Reforçamos um papel para esses miRNAs na patogênese da hanseníase, influenciando mecanismos como apoptose e autofagia na pele; A forma MB da doença ocorre dentro de um contexto social de maior vulnerabilidade social se comparado aos pacientes PB.