Análise multielementar usando microfluorescência de raios X em culturas 3D de células de neuroblastoma humano
Ano de defesa: | 2019 |
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Autor(a) principal: | |
Orientador(a): | |
Banca de defesa: | |
Tipo de documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
Instituição de defesa: |
Universidade do Estado do Rio de Janeiro
Centro de Tecnologia e Ciências::Instituto de Física Armando Dias Tavares Brasil UERJ Programa de Pós-Graduação em Física |
Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Palavras-chave em Português: | |
Link de acesso: | http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/16571 |
Resumo: | O neuroblastoma (NB) é uma neoplasia maligna no sistema nervoso que ocorre exclusivamente na infância e nos primeiros anos de vida. O NB acomete cerca de 8 % a 10 % dos casos de neoplasias em crianças, onde mais de 50 % dos casos apresentam doença metastática generalizada no momento do diagnóstico. Os elementos químicos são extremamente importantes no funcionamento de processos celulares, como reações metabólicas e expressões gênicas. A técnica de microfluorescência fluorescência de raios X (microXRF) tem sido amplamente empregada em análises de amostras biológicas por ser uma técnica não destrutiva, produzir dano térmico quase desprezível e permitir a análise de diversos elementos simultaneamente. O objetivo deste estudo foram obter as concentrações elementares presentes em esferoides de linhagens celulares de neuroblastoma humano (SH-SY5Y e SK-N-BE (2)). Além disso, determinar os limites de detecção do sistema de microXRF e analisar as distribuições espaciais (mapas bidimensionais) dos elementos presentes nas amostras comparando as linhagens tumorais de NB. Os esferoides celulares foram formados a partir de cultura celular em placa de 96 poços utilizando meio de cultura DMEM suplementado com 10% de SFB durante 5 dias de incubação. A análise por microXRF foi realizada através do espectrômetro M4 Tornado (Bruker Nano GmbH), sendo possível a detecção dos seguintes elementos: P, S, Cl, K, Ca, Fe, Cu e Zn. A partir de uma amostra certificada foi possível calcular o limite de detecção do sistema, estando este entre 0,8 µg.g⁻¹ (para cobre e zinco) até 7,2 µg.g⁻¹ (para fósforo). Os mapas bidimensionais dos elementos químicos mostraram distribuições não uniformes para todos os elementos e esferoides analisados. Além disso, os resultados obtidos através da quantificação mostraram que os valores obtidos para as concentrações elementares variaram desde valores mínimos de 1,5 µg.g⁻¹ até 3,0 µg.g⁻¹ para o elemento Zn e valores mínimos de 1064,0 µg.g⁻¹ até 2413,0 µg.g⁻¹ para o elemento P, respectivamente para as linhagens SK-N-BE (2) e SHSY5Y. Os resultados apresentaram grande dispersão devido a heterogeneidade dos esferoides celulares. Os resultados mostraram através do teste não paramétrico de Mann-Whitney com nível de significância de 5 % que as linhagens celulares apresentam diferenças significativas. |