Efeito de ExoU e papel de PAFR na expressão de citocinas relacionadas à inflamação em modelo murino de pneumonia aguda por Pseudomonas aeruginosa

• Ano de defesa: 2014
• Autor(a) principal: Flores, Vinícius Ribeiro
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Faculdade de Ciências Médicas; BR; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Microbiologia
• Palavras-chave em Português: Pseudomonas aeruginosa; ExoU; Cytokines; PAF; Citocinas; Pseudomonasaeruginosa; Pulmões Infecções; Toxinas bacterianas Citocinas . 5. Fator de Ativação de Plaquetas Fisiologia. 6. Infecção hospitalar .; Fator de Ativação de Plaquetas Fisiologia; Infecção hospitalar; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/14378

Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria Gram negativa oportunista de grande importância em infecções respiratórias adquiridas em ambiente hospitalar. ExoU é uma proteína bacteriana injetada no citosol de células hospedeiras pelo sistema de secreção do tipo III que está relacionada ao agravamento de infecções agudas. A ação de ExoU é decorrente da sua atividade tipo fosfolipase A2, que leva à liberação de ácido araquidônico e lisofosfolipídeos das membranas das células hospedeiras e posterior síntese de potentes mediadores da resposta inflamatória, como eicosanóides e o fator de ativação plaquetária (PAF). ExoU também é capaz de ativar NF-B, um fator transcricional que regula a síntese de moléculas implicadas na indução da resposta inflamatória. No presente estudo, a expressão de citocinas que participam da resposta inflamatória foi avaliada no pulmão de camundongos infectados com uma cepa produtora de ExoU (PA103) ou com sua mutante isogênica deficiente em ExoU (PA103∆exoU). Para isso, camundongos C57/BL6 foram tratados com o antagonista de PAF, WEB 2086, ou com o veículo e inoculados por via intratraqueal com P. aeruginosa ou salina. Após 24 horas, o RNA total dos pulmões foi purificado e convertido em cDNA para análise da expressão do mRNA de algumas citocinas por RT-PCR em tempo real. Nossos resultados mostraram um aumento significativo dos níveis de mRNA de todas as citocinas em resposta a ExoU, embora tenha sido observada uma grande variação dos níveis de expressão entre as moléculas. Além disso, o tratamento com WEB 2086 reduziu significativamente a expressão do mRNA de TNFα, IL-10, IL-6, IL-1β e IL-27 induzida por ExoU. Esses dados contribuem para a compreensão do papel de ExoU na patogênese e confirmam a importância do PAF como regulador da resposta inflamatória durante a pneumonia por P. aeruginosa