Avaliação da morfologia e viabilidade de folículos pre-antrais ovinos após criopreservação e cultivo in vitro de curta duração

• Ano de defesa: 2011
• Autor(a) principal: Gonçalves, Raphael Fernando Braga
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Ciências veterinárias; Criopreservação; Ovinos; Reproducao Animal
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=70712

<span style="font-style: normal;">A criopreservação de tecido ovariano tem como principal objetivo a manutenção deste tecido para sua posterior utilização, garantindo a preservação do material biológico de mulheres e fêmeas de animais de alto valor genético. Embora a criopreservação de tecido ovariano seja extensamente estudada, diversos pontos ainda necessitam ser elucidados, como a definição da concentração e tempo de exposição do agente crioprotetor a ser utilizado. Além disso, ainda não foram obtidos resultados satisfatórios relacionados ao cultivo </span><em>in vitro</em><span style="font-style: normal;"> de tecido ovariano previamente criopreservado. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos definir um protocolo eficiente para a criopreservação de tecido ovariano ovino utilizando o propanodiol (PROH) como agente crioprotetor e avaliar o tecido ovariano previamente criopreservado após cultivo </span><em>in vitro</em><span style="font-style: normal;"> de curta duração. Para tanto, o tecido ovariano foi fragmentado e exposto (5, 10 ou 20 minutos) e/ou congelado utilizando PROH em duas diferentes concentrações (1,0 ou 1,5 M). Os fragmentos de cada tratamento foram submetidos à avaliação da morfologia folicular por Histologia Clássica e à análise de viabilidade pela utilização do corante Azul de Tripan. Em seguida, após a definição do protocolo mais adequado (melhor tempo de exposição e concentração de PROH), foi realizado o cultivo </span><em>in vitro</em><span style="font-style: normal;"> do tecido ovariano por 2 ou 4 horas para posterior análise da morfologia e viabilidade folicular conforme descrito anteriormente. Os dados obtidos foram analisados por ANOVA seguida dos testes</span><em style="font-style: normal;"> </em><em style="">t</em> de Student e SNK, para verificar as diferenças entre os percentuais de folículos morfologicamente normais, ou do teste do Qui-Quadrado, para identificar diferenças nos percentuais de folículos viáveis. Os resultados obtidos demonstraram que a exposição por 5 minutos seguida de criopresevação do tecido em solução de 1,5 M de PROH garantiu um percentual de folículos viáveis semelhantes ao tecido fresco (<em style="">P&gt;0,05</em>). Durante o período de cultivo <em>in vitro</em>, os folículos apresentaram uma redução significativa (<em style="">P&lt;0.05</em>) na percentagem de folículos normais e viáveis em comparação ao tecido fresco. Assim, o presente trabalho concluiu que é possível criopreservar eficientemente o tecido ovariano ovino utilizando 1,5 M de PROH e exposição por 5 minutos, embora ocorra uma redução gradual na qualidade folicular do tecido criopreservado submetido a curtos períodos de cultivo<em style="font-style: normal;"> in vitro</em>. Palavras-chave: Criopreservação, Cultivo <em style="font-style: normal;">in vitro</em>, PROH, Tecido ovariano, Ovinos.