Dose inseminante, embriogênese e criopreservação de sêmen de tambaqui (Colossoma macropomum)

• Ano de defesa: 2011
• Autor(a) principal: Leite, Liliane Veras
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Ciências veterinárias; Fertilização In vitro - Indução da ovulação; Peixe; Sêmen; Tambaqui
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=70357

<div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">O </span><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);font-style:italic;">Colossoma macropomum </span><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">(tambaqui), por suas características produtivas e organolépticas, </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">está sofrendo os efeitos da sobrepesca, o que suscita o conhecimento de sua biologia </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">reprodutiva assim como o desenvolvimento e aprimoramento de biotecnologias visando a </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">otimização da reprodução desta espécie. Os objetivos deste trabalho foram determinar a dose </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">inseminante e acompanhar o desenvolvimento embrionário de tambaqui, bem como realizar a </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">criopreservação do sêmen em diferentes tratamentos e avaliar </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in vitro </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">e </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in vivo </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">a qualidade </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">seminal pós-descongelamento. Para isso o trabalho foi dividido em dois experimentos: (1) </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">Determinação da dose inseminante e acompanhamento do desenvolvimento embrionário de </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">C. </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">macropomum</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">; (2) Criopreservação do sêmen de </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">C. macropomum </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">em diferentes diluidores e </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">avaliação da qualidade seminal pós descongelamento </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in vitro </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">(através do CASA) e </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in vivo</span></div><div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">(capacidade fertilizante). Em ambos os experimentos foram utilizados reprodutores do plantel </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">do Departamento Nacional de Obras Contra as Secas (DNOCS) induzidos hormonalmente </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">com extrato pituitário de carpa. Para o experimento 1 foi feito um pool com sêmen de cinco </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">machos e um pool de ova de duas fêmeas para a fertilização artificial com diferentes </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">proporções de espermatozóides/ovócito (D1-50.666; D2-75.999; D3-101.332; D4-126.665; </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">D5-151.998 espermatozóides/ovócito). O desenvolvimento embrionário foi acompanhado </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">através de observações periódicas em estereoscópio até a eclosão dos ovos. Quando os </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">embriões alcançaram a fase de fechamento do blastóporo foi calculada a taxa de fertilização </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">nas diferentes doses inseminantes. Foi estimada uma equação de regressão para determinar a </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">proporção ideal dos gametas. Para o experimento 2, foram formados seis pools de sêmen que </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">foram diluídos em diferentes diluidores gerados da combinação de três diluentes (Água de </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">coco em pó-ACP</span><span style="font-size: 8.04pt; font-family: "Times New Roman";">® </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">; Ringer e Glicose) e dois crioprotetores (dimetilsulfóxido-DMSO e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">metilglicol). Após a diluição o sêmen foi envasado em palhetas de 0,5 mL, mantidas a 4°C </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">por 5 minutos, congelados em vapor de nitrogênio líquido (</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">Dry shiper</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">) por 5 minutos, e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">mergulhados em nitrogênio líquido (-197°C). Após o descongelamento o sêmen foi avaliado </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">quanto a cinética (através do </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">Computer Assisted Sperm Analyzer</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">-CASA). Os três melhores</span></div><div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">tratamentos foram avaliados quanto à morfometria no CASA, e capacidade fertilizante. Os </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">resultados do experimento 1 mostraram que a percentagem de fertilização aumentou de forma </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">linear segundo a equação &#374; =0,050 + 0,00000773X (R</span><span style="font-size: 8.04pt; font-family: "Times New Roman";">2 </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">=97,5) atingindo um platô em 84% na </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">proporção de 102.486 espermatozóides/ovócito, sendo portanto, esta dose recomendada para a </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">fertilização artificial de tambaqui. Os embriões apresentaram segmentação meroblástica </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">discoidal, típica de ovos telolécitos, com eclosão dos ovos ocorrendo 357 horas-grau após a </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">fertilização. No experimento 2 os melhores resultados de taxa de motilidade foram observados </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">quando o sêmen foi diluído com DMSO associado ao ACP</span><span style="font-size: 8.04pt; font-family: "Times New Roman";">® </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">(39%) ou à Glicose (44%), sendo </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">estas ainda inferiores à motilidade do sêmen fresco (98%) (P<0.05). As velocidades (VCL, </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">VAP e VSL) dos espermatozóides não diferiram entre os tratamentos (P>0.05). A cabeça dos</span></div><div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">espermatozóides do sêmen descongelado apresentaram-se maiores às do sêmen fresco </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">(P<0.05) independente do diluente utilizado. O ACP</span><span style="font-size: 8.04pt; font-family: "Times New Roman";">® </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">e a glicose apresentaram taxas de </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">fertilização acima de 50%, sendo portanto recomentados para a criopreservação de sêmen de</span></div><div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);font-style:italic;">C. macropomum.  </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">Palavras-chave: 1.Peixe. 2.Fertilização. 3.Congelação seminal. 4.ACP-104. 5.CASA</span></div>