Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2016 |
Autor(a) principal: |
AGUIAR, FRANCISCO LÉO NASCIMENTO DE |
Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Tese
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Palavras-chave em Português: |
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Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=82219
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Resumo: |
<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O principal objetivo desta tese foi estudar o efeito concentração-dependente dos hormônios </span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">insulina, hormônio folículo estimulante (FSH), bem como do fator de crescimento epidermal </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(EGF) no cultivo in vitro (CIV) de folículos pré-antrais equinos inclusos em tecido ovariano, </span><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">avaliando os parâmetros morfologia e desenvolvimento folicular, produção hormonal (todas </span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">as fases), espécies reativas de oxigênio (ROS) (Fases I, II, III), perfil metabolômico (Fase III), </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">níveis de apoptose, expressão proteíca para Ki-67 e para o receptor de EGF, bem como níveis </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de mRNA para GDF-9, BMP-15 e Cyclin-D2 (Fase IV). Para isso, fragmentos ovarianos </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">equinos foram cultivados em 4 diferentes condições: CIV utilizando meio de base (α-MEM+) </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">na ausência ou presença de suplementação com insulina em concentração fisiológica (10 </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">ng/mL) ou suprafisiológica (10 μg/mL) (Fase I); CIV em meio de base suplementado com </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diferentes concentrações (0, 10, 50 e 100 ng/mL) de FSH (Fase II) ou EGF (Fase III); e CIV </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">usando um meio de base (α-MEM+) enriquecido com insulina (10 ng/mL) e EGF (50 ng/mL), </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">na ausência ou presença de FSH (50 ng/mL) (Fase IV). A duração do cultivo foi de até 7 dias </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(Fases I, II e III) e de 15 dias (Fase IV). Na Fase I, observou-se que a concentração fisiológica </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de insulina (10 ng/mL) apresentou maiores (P < 0,05) percentagens de folículos </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">morfologicamente normais e em desenvolvimento quando comparado aos demais tratamentos, </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">após 7 dias de cultivo. Independente do período de cultivo, a produção de ROS foi menor (P < </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">0,05) no tratamento 10 ng/mL de insulina. O hormônio folículo estimulante na concentração </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de 50 ng/mL apresentou maior (P < 0,05) percentagem de folículos morfologicamente</span></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">normais e em desenvolvimento, bem como maior diâmetro folicular do que os demais </span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">tratamentos após 7 dias de cultivo (Fase II). Adicionalmente, esta concentração de FSH </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">manteve (P > 0,05) a produção de estradiol e de ROS ao longo do cultivo. De maneira geral, o </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">uso de EGF na concentração de 50 ng/mL resultou em maior (P < 0,05) percentagem de </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">folículos morfologicamente normais e em desenvolvimento, bem como maiores (P < 0,05) </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diâmetros folicular e oocitário após 7 dias de cultivo (Fase III). Além disso, a referida </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">concentração de EGF manteve a produção de ROS ao longo do cultivo. A análise do perfil </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">metabolômico do meio de cultivo após 7 dias revelou a presença de três substâncias (Dinex, </span><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Leonuriside A e Avobenzene) com potencial efeito negativo na sobrevivência, bem como </span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sobre o diâmetro folicular e oocitário. Finalmente, independente da suplementação com FSH, </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">o uso de um meio enriquecido contendo concentrações apropriadas de insulina e EGF </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">manteve os níveis de apoptose do tecido ovariano cultivado similares ao controle fresco não </span><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivado após 15 dias de cultivo (Fase IV). A expressão proteíca para EGFR, Ki-67 e os </span></font>níveis de RNAm para GDF-9 e Cyclin-D2 não diferiram entre os grupos tratados após 15 dias. Concluiu-se assim que: as concentrações de insulina (10 ng/mL), FSH (50 ng/mL) e EGF (50 ng/mL) são benéficas ao CIV FOPAs equinos inclusos em tecido ovariano por até 7 dias; e que um meio enriquecido contendo insulina e EGF manteve a morfologia e funcionalidade do tecido ovariano equino após 15 dias de cultivo, independente da adição de FSH.</div><div>Palavras - chave: Folículo pré-antral. Tecido Ovariano Equino. Insulina. FSH. EGF. Cultivo in vitro.</div> |