Utilização da água de coco em pó (ACP-204) como meio de manutenção e crescimento de células C6/36 (clone de Aedes albopictus SKUSE, 1894) e cultivo do vírus da dengue sorotipo 2

• Ano de defesa: 2001
• Autor(a) principal: Andrade, José Maciel
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Água de coco em pó; Biotecnologia; Dengue; Meio de Cultura
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=106038

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O cultivo de células C6/36 (clone Aedes albopictus Skuse, 1894), em meio nutriente de&nbsp;</span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Leibovitz (L-15) é amplamente utilizado para isolamento de arbovírus, em especial o vírus da&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">dengue. O presente trabalho teve como objetivo analisar a utilização da água de coco em pó&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(ACP-204) como meio de manutenção e crescimento de células C6/36 bem como sua utilização&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">para meio de cultivo do vírus dengue sorotipo 2. A cultura das células C6/36 foi realizada em&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">meio L-15 (meio de cultura Leibovitz com glutamina, Cultilab®) e em meio ACP-204,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">suplementado com peptonas a 1,58%. As células C6/36 foram cultivadas em garrafa de cultura&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de 25 cm2 e mantidas em estufa a 28 ºC. Culturas de células C6/36 estoque foram conservadas&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">a (-80 °C). Alíquotas de células C6/36 cultivadas em meio L-15 e em meio ACP-204 por um&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">período de sete dias foram submetidas ao Método de Transcrição e Translação (MTT) para&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">análise da viabilidade celular. Após análise da viabilidade das células C6/36 nos meios L-15 e</span></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ACP-204 fez-se a inoculação da suspensão do vírus DENV-2 em ambos os meios e incubouse&nbsp;</span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por sete dias em temperatura ambiente. Em seguida, foi realizado, em cada lote: o MTT&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">para análise de viabilidade celular; a técnica de imunofluorescência indireta, que oferece&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">subsídios para classificação e identificação de vírus que replicam em células C6/36; e a RTPCR,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">que possibilita a amplificação de sequências genômicas específicas de RNA viral&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">delimitadas por iniciadores (primers). Células não inoculadas com DENV-2 foram utilizadas&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">como controle. Os achados evidenciados pelo MTT mostraram que o meio ACP-204&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">funcionou no mesmo padrão de equivalência do meio L-15 para cultura de células C6/36. E no&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">que se refere ao cultivo da suspensão viral do DENV-2, o MTT revelou que o vírus dengue&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">comportou-se com parâmetro semelhante ao do meio L-15. Resultados obtidos pela&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">imunofluorescência indireta e RT-PCR evidenciaram a presença do DENV-2 no interior das&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">células C6/36 em ambos os meios. Os achados demonstraram que o ACP-204 funcionou de&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">forma satisfatória como meio de manutenção e crescimento de células C6/36 e para meio de&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">cultivo do vírus dengue sorotipo 2.&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Palavras-chave: Dengue. Meio de cultura. Água de coco em pó. Células C6/36. Sorotipo 2.</span></div>