Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2001 |
Autor(a) principal: |
Andrade, José Maciel |
Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Tese
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Palavras-chave em Português: |
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Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=106038
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Resumo: |
<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O cultivo de células C6/36 (clone Aedes albopictus Skuse, 1894), em meio nutriente de </span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Leibovitz (L-15) é amplamente utilizado para isolamento de arbovírus, em especial o vírus da </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">dengue. O presente trabalho teve como objetivo analisar a utilização da água de coco em pó </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(ACP-204) como meio de manutenção e crescimento de células C6/36 bem como sua utilização </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">para meio de cultivo do vírus dengue sorotipo 2. A cultura das células C6/36 foi realizada em </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">meio L-15 (meio de cultura Leibovitz com glutamina, Cultilab®) e em meio ACP-204, </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">suplementado com peptonas a 1,58%. As células C6/36 foram cultivadas em garrafa de cultura </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de 25 cm2 e mantidas em estufa a 28 ºC. Culturas de células C6/36 estoque foram conservadas </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">a (-80 °C). Alíquotas de células C6/36 cultivadas em meio L-15 e em meio ACP-204 por um </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">período de sete dias foram submetidas ao Método de Transcrição e Translação (MTT) para </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">análise da viabilidade celular. Após análise da viabilidade das células C6/36 nos meios L-15 e</span></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ACP-204 fez-se a inoculação da suspensão do vírus DENV-2 em ambos os meios e incubouse </span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por sete dias em temperatura ambiente. Em seguida, foi realizado, em cada lote: o MTT </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">para análise de viabilidade celular; a técnica de imunofluorescência indireta, que oferece </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">subsídios para classificação e identificação de vírus que replicam em células C6/36; e a RTPCR, </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">que possibilita a amplificação de sequências genômicas específicas de RNA viral </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">delimitadas por iniciadores (primers). Células não inoculadas com DENV-2 foram utilizadas </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">como controle. Os achados evidenciados pelo MTT mostraram que o meio ACP-204 </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">funcionou no mesmo padrão de equivalência do meio L-15 para cultura de células C6/36. E no </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">que se refere ao cultivo da suspensão viral do DENV-2, o MTT revelou que o vírus dengue </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">comportou-se com parâmetro semelhante ao do meio L-15. Resultados obtidos pela </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">imunofluorescência indireta e RT-PCR evidenciaram a presença do DENV-2 no interior das </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">células C6/36 em ambos os meios. Os achados demonstraram que o ACP-204 funcionou de </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">forma satisfatória como meio de manutenção e crescimento de células C6/36 e para meio de </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">cultivo do vírus dengue sorotipo 2. </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Palavras-chave: Dengue. Meio de cultura. Água de coco em pó. Células C6/36. Sorotipo 2.</span></div> |