ESTUDO DOS FATORES QUE AFETAM A EFICIÊNCIA DO CULTIVO IN VITRO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS CAPRINOS E BOVINOS: EFEITO DO REGIME DE TROCA, MEIOS DE CULTIVO DE BASE E SUPLEMENTOS

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2013
Autor(a) principal: ARAÚJO, VALDEVANE ROCHA
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=82420
Resumo: <div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">RESUMO</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Os objetivos do presente trabalho foram: 1) verificar o efeito do regime de troca de meio (caprinos e bovinos) e do tipo de meio de cultivo de base (bovinos) sobre o crescimento/viabilidade in vitro de folículos secundários isolados; 2) avaliar a influência da proteína morfogenética óssea-6 (BMP-6) na ausência ou presença do hormônio folículo estimulante (FSH) sobre o crescimento/viabilidade de folículos pré-antrais caprinos cultivados in situ ou isolado; e quantificar os níveis de RNAm para BMPR-1A/R-2 e Smads 1/4/5/6/7/8 antes e após o cultivo de folículos secundários caprinos isolados; 3) investigar o efeito do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) sobre o desenvolvimento de folículos secundários caprinos isolados; 4) verificar a influência da adição de VEGF, fator de crescimento semelhante à insulina-1 (IGF-1) e/ou hormônio do crescimento (GH) ao meio de cultivo in vitro de folículos secundários bovinos isolados utilizando sistemas de cultivo bi (2D) e tridimensional (3D). Para o cultivo in situ, fragmentos de córtex ovariano foram cultivados por um ou sete dias em MEM+ adicionado de BMP-6 (0, 1, 10, 50 ou 100 ng/mL). Folículos secundários foram isolados por microdissecção e cultivados por 18 (caprino) ou 32 (bovino) dias em &#945;MEM+ (caprino e bovino) ou TCM-199+ (bovino) na presença ou ausência de FSH. O meio foi ainda suplementado com BMP-6 (caprino: 1 ou 10 ng/mL), VEGF (caprino: 10 ou 100 ng/mL; bovino: 100 ng/mL), IGF-1 (bovino: 50 ng/mL), GH (bovino: 50 ng/mL) ou VEGF+IGF-1+GH (bovino). Os resultados demonstraram que a adição periódica de meio aumentou significativamente as percentagens de oócitos (&#8805; 100 &#956;m) caprinos destinados à maturação in vitro. O diâmetro, a taxa de crescimento, formação de antro e as concentrações de estradiol de folículos secundários bovinos isolados foram maiores (P&lt;0,05) na adição periódica de meio utilizando &#945;-MEM (MEM-S) quando comparada ao controle (MEM-C). A BMP-6 aumentou significativamente o percentual de folículos atrésicos e promoveu alterações ultraestruturais nos folículos primordiais caprinos após cultivo in situ. Em caprinos, a BMP-6 (1 ng/mL) promoveu maiores taxas de folículos antrais e completos níveis de expressão de RNAm da via de sinalização das BMPs; e o VEGF (10 ou 100 ng/mL) aumentou o diâmetro, a taxa de crescimento folicular e de recuperação oocitária, apresentando maiores percentagens de oócitos em metáfase II (P&lt;0,05). Em bovinos, o VEGF melhorou as taxas de crescimento e formação de antro e o GH aumentou os níveis de estradiol após cultivo 2D e 3D, respectivamente (P&lt;0,05). Diante do exposto, pode-se concluir que: 1) a adição periódica de meio melhorou o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">10</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivo de folículos secundários caprinos e bovinos isolados; 2) a BMP-6 induziu a atresia em folículos primordiais caprinos, porém promoveu o desenvolvimento in vitro de folículos secundários isolados; 3) a adição de VEGF melhorou as taxas de maturação de oócitos oriundos de folículos pré-antrais caprinos isolados cultivados in vitro e finalmente; 4) a adição de VEGF (sistema 2D) e GH (sistema 3D) melhoraram, respectivamente, o desenvolvimento folicular (formação de antro e taxa de crescimento) e a produção de estradiol em folículos secundários bovinos isolados cultivados in vitro.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Bovino. Caprino. Competência oocitária. Estradiol. Folículos pré-antrais.</span></font></div>