PROTEÍNAS DA MEMBRANA PLASMÁTICA DO ESPERMATOZOIDE SUÍNO E SUA RELAÇÃO COM A RESISTÊNCIA AO PROCESSO DE CRIOPRESERVAÇÃO

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: GUIMARÃES, DAIANNY BARBOZA
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Suinocultura
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=82779

<font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">RESUMO O uso do sêmen congelado está associada a baixos índices produtivos. Por isso, estudos têm sido realizados com a finalidade de identificar novos diluentes e proteínas presentes no sêmen que possibilitem a busca por marcadores de congelabilidade. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo testar a água de coco em pó como diluente alternativo e identificar as proteínas da membrana plasmática do espermatozoide que estejam relacionadas com a proteção do espermática durante o processo de criopreservação. Para tanto, o sêmen de quinze reprodutores foi coletado uma vez por semana e foi retirado um total 2,5 x109 sptz/ejaculado para o protocolo de congelação e 10 x109 sptz/ejaculado para o protocolo de proteômica. Para a criopreservação, o sêmen foi diluído em Beltsville Thawing Solution (BTS - Controle) e Água de Coco em Pó (ACP-103®). Os ejaculados foram submetidos a uma curva de resfriamento lenta, onde foram feitas análises de vigor e motilidade em cada passo. O sêmen descongelado foi resuspendido em seus respectivos diluentes e analisado quanto ao vigor, motilidade, vitalidade, integridade acrossomal e funcionabilidade da membrana. Para o estudo das proteínas da membrana dos espermatozoides, estes foram submetidos à eletroforese bidimensional. Os géis foram corados com Coomassie coloidal, digitalizados e analisados por meio do aplicativo PDQuest. Para a busca por marcadores de congelabilidade, foi feita uma divisão dos animais em dois grupos: congelabilidade boa (GFEs) e ruim (PFEs), através dos resultados de vigor e motilidade após a descongelação. Isto possibilitou comparar as proteínas presentes em cada grupo e correlacioná-las com a criopreservação do sêmen. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso. A análise estatística foi processada através da avaliação das médias e desvios padrões, aos quais foram aplicados os testes de Mann-Witney e o teste t de Student. Para comparação de múltiplas médias foi utilizado o teste ANOVA com pós-teste de TUKEY. Todos os testes foram realizados com um índice de significância de 0,05. Quanto ao protocolo de congelação, observou-se que não houve diferença significativa entre os tratamentos (p&gt;0,05) durante as análises de vigor e motilidade que compõem a curva de resfriamento, e na descongelação, para as análises de vitalidade e membrana acrossomal intacta. Já após a descongelação, o BTS apresentou melhores resultados de vigor espermático, motilidade espermática e funcionabilidade da membrana (p&lt;0,05). Embora os diluentes não tenham apresentando resultados semelhantes, os resultados obtidos com o diluente ACP estão dentro dos parâmetros aceitáveis para sêmen suíno. Os quatorze animais foram separados em dois grupos, onde seis animais foram considerados com boa congelabilidade (GFEs) e apresentaram uma média para vigor e motilidade espermática de 2,2±0,8 e 41,8±22,9, respectivamente, enquanto que o grupo de congelabilidade ruim (PFEs) foi composto por oito animais que apresentaram uma média de 1,9±0,6 de vigor e 26,8±17,5 de motilidade espermática. Foi encontrado uma média de 263±62,2 spots por gel e um total de 234,2±54,6 spots foi detectado de forma consistente nos géis dos quatorze animais. Foram encontrados 5 spots que divergiram significativamente entre os grupos, onde 3 foram encontrados com maior intensidade no grupo PFES e 2 spots foram mais expressos no GFEs. Quanto a curva de resfriamento e a água de coco em pó, estas podem ser utilizadas no protocolo de criopreservação do sêmen suíno, visto que ambas asseguraram qualidade da viabilidade espermática que possa vir a ser utilizada na inseminação artificial e, quanto ao estudo da composição proteica da membrana espermática, os cinco spots detectados podem atuar como possíveis marcadores de congelabilidade para o sêmen suíno. Palavras-chave: Criopreservação; Proteômica; Sêmen suíno.</span></font>