CONCEPTUS ABNORMALITIES AND STRATEGIES TO DELIVER NUCLEIC ACIDS INTO EMBRYOS FOR THE EPIGENETIC MODULATION OF BOVINE SOMATIC NUCLEI FOR CLONING BY NUCLEAR TRANSFER

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2017
Autor(a) principal: AGUIAR, LUÍS HENRIQUE DE
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=84563
Resumo: <div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Desde o início da embriologia, cientistas se perguntam como as células embrionárias totipotentes acabam se tornando um indivíduo com diferentes órgãos e tecidos e com diferentes funções. Entretanto, desde as primeiras tentativas até alcançar o primeiro sucesso, anos de pesquisa foram feitos para entender, mesmo parcialmente, os eventos relacionados à reprogramação celular. Assim, foi possível que uma célula diferenciada pudesse ser trazida novamente para um estado de totipotência e criar novos indivíduos abrindo um novo campo de pesquisa. Desde então, a clonagem por transferência nuclear de células somáticas (TNCS) tem sido utilizada como ferramenta para entender os mecanismos fisiológicos da reprogramação celular, produzir animais transgênicos, recuperar espécies ameaçadas de extinção ou até mesmo reproduzir animais de estimação. No entanto, a eficiência técnica ainda é baixa, com 1 a 5% dos embriões transferidos gerando animais saudáveis. Este fato é causado pela falha na reprogramação epigenéticas de células embrionárias onde os embriões clonados têm um padrão de metilação distinto em comparação com os embriões produzidos in vivo ou in vitro. Enquanto os embriões in vivo sofrem uma queda na metilação do DNA nas primeiras clivagens, os embriões clonados mantêm-no num padrão elevado resultando em anormalidades na expressão de genes, o que pode levar a subsequente falha no desenvolvimento. Para passar através deste obstáculo foram feitas muitas tentativas, como utilizar oócitos de boa qualidade para reprogramar o núcleo da célula doadora ou selecionar células de melhor qualidade para resultar num processo de clonagem mais eficiente. Além disso, numerosas tentativas foram e ainda são usadas para induzir quimicamente o processo de reprogramação alterando o padrão de metilação embrionária. No entanto, nenhuma das alternativas mostrou-se totalmente eficaz e sem efeitos colaterais, o que abre um espaço para se tentar estratégias como o RNA interferência e novas ferramentas de edição de DNA como o sistema CRISPR/Cas9 com o objetivo de modular embriões clonados resultando em melhor eficiência. Colaborando com estas informações, este trabalho tem por objetivo avaliar a morfometria de gestações de embriões produzidos in vivo ou in vitro, também por TNCS, para entender quais são as diferenças encontradas nos diferentes sistemas e o que devemos esperar de prenhezes mais parecidas com o fisiológico. Dessa forma foi possível encontrar diferenças nas prenhezes e fetos do grupo NT-HMC, onde houve maior perda de gestação, fetos menores no dia 51, peso fetal quase duas vezes maior que nos grupos IVF e IVD; área e peso placentário maior, presença maior de placentônios gigantes; entre outros achados. Estas diferenças demonstram as alterações no terço final da gestação, de problemas que ocorrem</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">inicialmente nos primeiros dias do desenvolvimento embrionário. Sabendo do grau dessas diferenças, podemos compreender o processo de reprogramação epigenética desde o início e seus efeitos subsequentes nos animais produzidos e assim relacionar o efeito das estratégias de manipulação do perfil de metilação do DNA embrionário. Ainda, essas estratégias podem facilitar a compreensão da reprogramação celular eo papel da metilação no DNA, facilitando a busca de novas formas de resolução de problemas relacionados a doenças epigenéticas.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Metilação. RNA de interferência. Transferência nuclear de célula somática (TNCS). Bovino.</span></font></div>