VITRIFICAÇÃO DE TECIDO OVARIANO CAPRINO: EFEITO DE UM NOVO DISPOSITIVO FECHADO E ADIÇÃO DE CATALASE

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: Carvalho, Adeline de Andrade
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Caprinos
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=88095

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O desenvolvimento de uma técnica segura e prática para a vitrificação de tecido</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ovariano caprino que previna o contato direto da amostra com o nitrogênio líquido, bem</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">como a contaminação da amostra biológica é uma necessidade da criopreservação de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">tecido ovariano. Assim, os objetivos deste estudo foram: 1) desenvolver uma nova</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">técnica de vitrificação em um sistema fechado e avaliar a morfologia e viabilidade</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">folicular após a vitrificação de tecido ovariano em fragmento, hemi e ovário inteiro</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(Fase 1); 2) avaliar a morfologia e ultraestrutura folicular após vitrificação de tecido</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ovariano em fragmento, hemi e ovário inteiro e cultivo in vitro de curta duração (Fase 2)</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">e 3) analisar o efeito da adição de catalase na solução de vitrificação e/ou remoção do</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">agente crioprotetor sobre a morfologia e viabilidade folicular bem como sobre os níveis</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de espécies reativas de oxigênio (Reactive Oxygen Species - ROS) e integridade do</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">DNA (Fase 3). Na Fase 1 não foi observada diferença no percentual de folículos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">morfologicamente normais e viáveis (P&gt;0,05) após a vitrificação quando comparado ao</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">tecido ovariano fresco, independente da forma do tecido ovariano vitrificado. Na Fase 2,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">antes do cultivo in vitro, foi observada uma redução (P&lt;0,05) no percentual de folículos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">morfologicamente normais, em todas as formas vitrificadas (fragmento, hemi e ovário</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">inteiro), quando comparado ao controle fresco. Além disso, foram verificadas grandes</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">alterações ultraestruturais quando o tecido ovariano foi vitrificado em ovário inteiro.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Após o cultivo in vitro, a morfologia folicular foi melhor preservada quando o tecido</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ovariano foi vitrificado em fragmento, comparada à vitrificação em hemi ou ovário</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">inteiro (P&lt;0,05) e a ultraestrutura revelou que a vitrificação de hemi-ovário resultou em</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">maior presença de vacúolos do que a vitrificação de fragmentos. Na Fase 3 observou-se</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">que a vitrificação sem a presença de catalase resultou em maior nível de ROS do que no</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">tecido fresco, contudo, a presença de catalase, independente do momento de adição,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">manteve os níveis de ROS similares ao controle fresco. Não houve diferença quanto à</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">viabilidade folicular (P&gt;0,05) e proteínas sinalizadoras de dano (&#947;H2AX) e reparo</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(53BP1) do DNA entre os tratamentos testados. Resultados similares foram observados</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">para a morfologia folicular e fragmentação do DNA quando avaliados os grupos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">criopreservados. Em conclusão, a técnica de vitrificação Ovarian Tissue Cryossystem</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(OTC) é eficaz para a criopreservação de tecido ovariano caprino, pois mantém a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">morfologia, a ultraestrutura e a viabilidade folicular, compatíveis ao tecido fresco, após</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">11</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">aquecimento. O uso de catalase no protocolo de vitrificação também é necessário para</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">manter os níveis de ROS similar ao observado no tecido ovariano fresco.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Criopreservação. Antioxidante. Folículo pré-antral. Cabra.</span></font></div>