Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2012 |
| Autor(a) principal: |
Lima, Isadora Machado Teixeira |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=72042
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Resumo: |
<div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">Esse estudo teve como objetivos: 1) quantificar os níveis de RNAm para os receptores de kit </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">ligand (KL) e proteína morfogenética óssea 15 (BMP-15) em folículos ovarianos caprinos </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">utilizando RT-PCR em tempo real; 2) investigar o papel do KL, associado ou não ao </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">hormônio folículo estimulante (FSH) em meio dinâmico, sobre a sobrevivência, ativação e </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">crescimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in situ</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">; 3) avaliar os efeitos do KL e </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">da BMP-15 sobre a sobrevivência, formação de antro e crescimento </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in vitro </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">de folículos </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">secundários caprinos isolados, bem como sobre a retomada da meiose de seus oócitos. Para o </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">cultivo </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in situ</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">, fragmentos ovarianos foram cultivados por 16 dias em meio α-MEM</span><span style="font-size: 7.92pt; font-family: "Times New Roman";"><sup>+</sup> </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">contendo KL (50 ng/mL) e/ou FSH (50 ng/mL) dos dias 0 a 8 e/ou 8 a 16 de cultivo. Antes e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">após o cultivo, os fragmentos foram analisados por histologia, microscopia eletrônica de </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">transmissão e microscopia de fluorescência, sendo os folículos mensurados e classificados em </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">primordiais, transição, primários e secundários, bem como em normais ou atrésicos. Quanto </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">ao cultivo de folículos isolados, folículos secundários foram microdissecados e cultivados por </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">18 dias em α-MEM</span><span style="font-size: 7.92pt; font-family: "Times New Roman";"><sup>+</sup> </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">suplementado ou não com diferentes concentrações de BMP-15 (10, 50 </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">ou 100 ng/mL) ou KL (50 ou 100 ng/mL), sendo este último fator testado na ausência ou </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">presença de FSH. Após o cultivo, os oócitos foram destinados à maturação </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in vitro </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">posteriormente avaliados quanto à viabilidade e retomada da meiose. Os resultados da RT-</span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">PCR mostraram que, com a progressão de folículos primários para secundários, houve uma </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">redução nos níveis de RNAm para o receptor do KL (c-kit) e para um receptor da BMP-15 </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">(BMPRII). Além disso, maiores níveis de RNAm foram observados para c-kit nos complexos </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">cumulus</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">-oócito de pequenos e grandes folículos antrais em comparação às suas respectivas </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">células da granulosa/teca, ocorrendo o mesmo para o BMPRII nos grandes folículos antrais. </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">Verificou-se ainda níveis maiores de RNAm para o receptor tipo I da BMP-15 (BMPRIB) nas </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">células da granulosa/teca de grandes folículos antrais em comparação àquelas de pequenos </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">antrais. Após 16 dias de cultivo </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in situ</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">, observou-se que o meio dinâmico contendo KL até o </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">dia 8 e FSH do dia 8 ao dia 16 manteve a integridade ultraestrutural e induziu a ativação e o </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">crescimento folicular. Quanto aos folículos isolados, a adição de 50 e/ou 100 ng/mL de KL ao </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">cultivo, na ausência de FSH, promoveu a sobrevivência e melhorou a formação de antro, </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">crescimento oocitário e retomada da meiose após 18 dias. Já 50 ng/mL de BMP-15 manteve a </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">ultraestrutura e estimulou a formação de antro e o crescimento de folículos isolados. Em </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">conclusão, os resultados deste estudo mostraram que os RNAm para c-kit, BMPRIB e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">BMPRII foram detectados em todas as categorias foliculares e tipos celulares investigados. A </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">utilização de KL e FSH de forma dinâmica em cultivo </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in situ</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">, bem como de KL (50 e/ou 100 </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">ng/mL) e BMP-15 (50 ng/mL) em cultivo de folículos secundários isolados, promoveu a </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">manutenção da sobrevivência folicular e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos. </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">Palavras-chave: KL. BMP-15. Folículos pré-antrais. Cultivo </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; font-style: italic;">in vitro</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">. Caprinos.</span></div> |
