Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2017 |
| Autor(a) principal: |
Wanderley, Leandro Batista |
| Orientador(a): |
Braga, Maria Cynthia |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Não Informado pela instituição
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Link de acesso: |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/28585
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Resumo: |
As técnicas diagnósticas para a esquistossomose apresentam baixa acurácia, tornando-se necessárias novas técnicas para seu diagnóstico. O objetivo do estudo foi avaliar o desempenho de dois sistemas Nested PCR (NPCR) para o diagnóstico de S. mansoni em caramujos e amostras humanas. Foram otimizados quatro ensaios de PCRs simples testando diferentes concentrações de primers e magnésio. Em seguida, esses sistemas foram combinados em duas NPCRs. A sensibilidade dos sistemas foi avaliada nas concentrações entre 1ng e 0,1fg de DNA genômico de S. mansoni e a especificidade com DNA de cercária ave. Nas amostras humanas, a NPCR1 foi avaliada apenas em DNA extraído de amostras de LCR (n=50) de pacientes com ou sem neuroesquistossomose. A NPCR2 foi avaliada em amostras de sangue e urina de indivíduos infectados (n=99) e não infectados (n=21). Para os caramujos, o sistema NPCR2 foi avaliado por mimetismo da infecção em lotes de B. glabrata (n=50), adicionando diferentes concentrações de DNA (1ng, 10pg e 10fg) antes da extração, e através de lotes contendo diferentes quantidades de caramujos infectados em laboratório. A NPCR2 foi cem vezes mais sensível que a NPCR1 amplificando 0,1fg de DNA. Os dois sistemas amplificaram o DNA da cercaria de ave, mas apenas a NPCR2 conseguiu distinção entre as bandas. A NPCR1 apresentou 80% de sensibilidade, 100% de especificidade e valor preditivo positivo, 88% de valor preditivo negativo e 92% de acurácia no LCR. Já a NPCR2 apresentou uma melhor sensibilidade para as amostras de urina, apresentando baixa acurácia no sangue. Para o mimetismo em caramujos, o sistema de NPCR2 amplificou 1ng de DNA, e o lote contendo 1 caramujo com 5 dias de infecção. Conclui-se que a técnica permite o diagnóstico da doença em caramujos e amostras humanas, principalmente em pacientes com neuroesquistossomose. |
