Caracterização fenotípica e funcional de subpopulações de linfócitos t reguladores (TREG) Na reação tipo 2 (ENL) da hanseníase

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Castro, Katherine Kelda Gomes de
• Orientador(a): Sarno, Euzenir Nunes, Esquenazi, Danuza de Almeida
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/26852

O Eritema Nodoso Leproso (ENL) é uma manifestação aguda e sistêmica, que ocorre de forma súbita, podendo ser grave e levar pacientes de hanseníase ao óbito. O episódio reacional é observado em cerca da metade dos pacientes multibacilares (MB), principalmente na forma lepromatosa polar (LL) e sua gênese pode ocorrer em qualquer momento do tratamento poliquimioterápico, inclusive antecedendo o mesmo. Incapacidades físicas associadas ao ENL são fonte de extremo sofrimento e retirada do mercado de trabalho de grande parte dos pacientes. No ENL ocorre progressão da resposta imune celular para um cenário reativo e ainda pouco compreendido. Assim, esse trabalho se propôs a caracterizar fenotípica e funcionalmente os linfócitos Treg CD4+ e CD8+ periféricos, tanto ex vivo, quanto em resposta ao M. leprae (ML), de 12 pacientes com ENL, cujos dados foram comparados com 8 pacientes LL e 10 voluntários sadios (VS) de área endêmica para a hanseníase, todos moradores do Rio de Janeiro. A frequência dessas células e sua atividade funcional foram avaliadas através da análise ex vivo da expressão de CTLA-4 e da determinação da frequência in vitro de células produtoras de TGF-\03B2 e IL-10, por citometria de fluxo multiparamétrica Ademais, a produção de citocinas em sobrenadante (SN) de culturas de células mononucleares periféricas (PBMC) frente ao ML, através de ensaio imunoenzimático (ELISA). Uma redução significativa das células Treg CD4+ ex vivo foi observada nos pacientes com ENL (p<0,001), além do envolvimento restrito de CTLA-4 em suprimir resposta ao ML em todos os grupos. A análise in vitro também demonstrou a redução significativa (p<0,0001) das Treg CD4+ no grupo ENL, com inalteração de suas frequências mesmo após estímulo com ML. A avaliação da atividade funcional in vitro revelou que as Treg CD4+ produtoras de TGF-\03B2 estão significantemente reduzidas nos pacientes com ENL em relação ao grupo LL (p<0,05), enquanto as Treg CD4+/IL-10+ não diferiram entre os grupos. De acordo com o estudo, as Treg CD8+ não estão envolvidas na gênese do ENL. Por fim, o grupo ENL apresentou níveis significativamente aumentados na produção de IL-6 por PBMC em comparação aos outros grupos, tanto em culturas não estimuladas (NE), quanto em resposta ao ML (p<0,05). O trabalho revelou ainda níveis mais elevados de produção de IL-17, IL-23 e IFN-\03B3 em PBMC no grupo ENL em comparação ao outro grupo LL, embora sem significância. Os dados obtidos sugerem uma mudança transitória na regulação da resposta imune mantida por células Treg CD4+ no ENL, como observado na forma LL, tornando o microambiente permissivo para a instalação do processo reacional.