Imunogenicidade e eficácia de duas proteínas recombinantes de Leishmania (Viannia) braziliensis em modelo de infecção experimental em camundongos Balb/C e hamster dourado

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Tostes, Priscila de Assis
• Orientador(a): Almeida, Renato Porrozzi de, Cuervo Escobar, Patricia
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/30988

Diferentes estudos têm sido realizados para o desenvolvimento de uma vacina contra a leishmaniose cutânea (LC), utilizando diversos modelos experimentais que reproduzem a doença humana. Porém, ainda não existe uma vacina que promova uma proteção sólida contra essa doença. A vacinação é considerada uma forma de controle de doenças com efetiva redução da mortalidade e da morbidade. Para tal, a informação a respeito dos antígenos imunogênicos de Leishmania é importante devido à complexidade do parasita, além da identificação de novos antígenos permitir o melhor entendimento do processo patológico e a criação de estratégias vacinais. Dada a importância epidemiológica global da LC, a busca por novas ferramentas que visam auxiliar no controle e terapêutica da doença podem contribuir para a minimização do impacto dessa patologia. No cenário epidemiológico brasileiro e da América Latina, a espécie L. (V.) braziliensis possui uma posição de destaque devido sua ampla distribuição. Com base no mapa proteômico de cepas de L. (V.) braziliensis desenvolvido pelo nosso grupo, identificamos duas moléculas candidatas ao desenvolvimento de vacinas de segunda geração. Nesta dissertação foram expressas duas proteínas recombinantes (Lb1r e Lb2r) de L. (V.) braziliensis e avaliadas em separado e em conjunto, quanto ao seu potencial imunogênico e sua capacidade de induzir proteção contra o desafio com L. (V.) braziliensis, nos modelos experimentais de camundongos BALB/c e hamsters dourados Os animais foram separados em grupos que receberam separadamente Lb1r + CpG ODN ou Lb2r + CpG ODN, ou ainda Lb1r + Lb2r + CpG ODN, em 3 doses. Os resultados demonstram a imunogenicidade dos antígenos recombinantes através da promoção da produção de altos níveis de anticorpos IgG1 e IgG2a específicos em camundongos BALB/c. As células do baço dos camundongos do grupo que recebeu as duas proteínas associadas ao adjuvante apresentaram um aumento na razão de IFN-\03B3 / IL-10, em relação ao grupo que recebeu somente o adjuvante, após a imunização. Os grupos não apresentaram diferença estatística na frequência de células T CD4+ e CD8+ produtoras de IFN-\03B3, TNF, IL-4, IL-10 e IL-13, após a imunização ou após o desafio. A análise comparativa dos grupos antes e após o desafio revelou um aumento significativo na frequência de linfócitos T CD4+ produtores de IFN-\03B3 no grupo que recebeu somente o antígeno Lb1r associado ao adjuvante, pós-desafio. As diferentes formulações utilizadas na imunização não induziram proteção contra a infecção por L. (V.) braziliensis nos modelos camundongo BALB/c e hamster dourado, uma vez que não foi observada diferença significativa no tamanho e na gravidade das lesões apresentadas, comparados aos grupos controles (PBS e CpG ODN). Entretanto, o grupo que recebeu as duas proteínas associadas ao CpG ODN apresentou lesões sempre menores e menos graves. Esse trabalho foi uma prova de conceito da aplicabilidade dos antígenos recombinantes de L. (V.) braziliensis Lb1r e Lb2r em estudos de vacinas. Os resultados obtidos contribuem com dois antígenos imunogênicos e capazes de modular a resposta imune. Porém, diferentes formulações e estratégias de administração precisam ser empregadas para que possamos atingir uma melhor eficácia com o uso destes antígenos.