Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2020 |
Autor(a) principal: |
Luz, Yasmin da Silva |
Orientador(a): |
Fullam, Juliana Perrone Bezerra de Menezes |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Dissertação
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Não Informado pela instituição
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Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Link de acesso: |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/50388
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Resumo: |
INTRODUÇÃO: As leishmanioses podem apresentar diferentes manifestações clínicas, que variam de lesões na pele no local da inoculação até lesões disseminadas para órgãos internos como baço e fígado. A disseminação e homing de células infectadas contendo antígenos de Leishmania são fundamentais para a sobrevivência e estabelecimento do parasito no hospedeiro. Entretanto, ainda hoje, pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos na adesão da célula hospedeira e sua migração na infecção por este protozoário. Em estudo realizado em ambiente bidimensional, foi observada redução da migração de macrófagos após a infecção por L. amazonensis, associada a redução da formação de complexos de adesão e alteração da dinâmica de actina. Entretanto, o processo de migração transendotelial de macrófagos envolve sinais regulatórios oriundos de um ambiente tridimensional. OBJETIVO: Assim, o presente estudo tem como objetivo avaliar a migração de macrófagos infectados por Leishmania e os mecanismos envolvidos neste processo, em ambiente tridimensional. METODOLOGIA: Para isso, macrófagos derivados de medula óssea foram infectados por L. amazonensis, L. braziliensis ou L. infantum e colocados em matriz de colágeno I para avaliação da migração utilizando High-Content Analysis System do modelo Operetta (PerkinElmer). Adicionalmente, avaliamos a formação de complexos de adesão pela imunomarcação de p-FAK e p-paxilina, a polimerização do citoesqueleto de actina por faloidina, Cdc42, RhoA, Rac1 e gelsolina, utilizando microscopia confocal ou quantificação da intensidade média de fluorescência por poço através do Operetta. Além disso, utilizando matrigel, avaliamos a secreção de proteases por estas células. RESULTADOS: Nossos resultados mostram redução da migração de macrófagos infectados por L. amazonensis, L. braziliensis e L. infantum em ambiente tridimensional. Adicionalmente, as análises mostram que a infecção por diferentes espécies de Leishmania não altera a área de degradação de matriz extracelular por macrófagos. CONCLUSÃO Nossos dados em conjunto mostram que a infecção por L. amazonensis, L. braziliensis ou L. infantum leva à redução da migração de macrófagos em ambiente tridimensional. Esta redução na migração está associada à alteração da dinâmica de actina e redução formação de complexos de adesão nessas células. |