Efeitos da edição de ebv-miR-BARTs do vírus de Epstein-Barr em vias do checkpoint imune e linfomagênese em células de Linfoma de Burkitt.

• Main Author: Silva, Amanda Rodrigues Marques da
• Publication Date: 2023
• Format: Bachelor thesis
• Language: por
• Source: Repositório Institucional da UNESP
• Download full: http://hdl.handle.net/11449/250074
• topic: Linfoma de Burkitt; Vírus de Epstein-Barr; miR-BARTs

O presente trabalho apresenta sobre os efeitos da edição de ebv-miR-BARTs do vírus de Epstein-Barr em vias do checkpoint imune e linfomagênese em células de Linfoma de Burkitt. O objetivo será investigar os efeitos da supressão de miRNAs virais em linhagens de células humanas infectadas pelo EBV (genoma selvagem ou editado) em relação a diferentes parâmetros avaliados in vitro, tais como migração, clonogênese e expressão de genes do checkpoint imune. Para este presente trabalho foram usadas amostras para os experimentos da linhagem de células Akata-Cas9, ocorreu a extração do DNA e as linhagens de células EBV que foram positivas, foram submetidas à extração de RNA. As amostras foram tratadas para RT-PCR e, delas, foi produzido o cDNA. Na etapa de clonagem, foram usados construtos para a expressão de RNAs guias dirigidos aos miR-BART-7 e miR-BART-9. O vetor foi purificado e utilizado para a transformação da bactéria DH5α, uma cepa de E. coli. As colônias antibiótico resistente foram crescidas e submetidas à PCR colony e sequenciamento. Com base nestas informações, espera-se ao final deste estudo contribuir no entendimento da importância dos miR-BARTs 7 e 9 do EBV na manutenção do fenótipo maligno e modulação de vias de sinalização intracelular envolvidas na linfomagênese.