Efeito pró-osteogênico da cistatina recombinante de cana-de-açúcar CaneCPI-5 em células pulpares humanas

• Main Author: Cassiano, Ana Flávia Balestrero [UNESP]
• Publication Date: 2022
• Format: Master thesis
• Language: por
• Source: Repositório Institucional da UNESP
• Download full: http://hdl.handle.net/11449/236310
• topic: Cistatinas; Catepsinas; Células-tronco mesenquimais; Diferenciação celular; Cystatins; Cathepsins; Mesenchymal stem cells; Cell differentiation

O aumento da atividade de cisteína catepsinas (um grupo de cisteíno proteases) está relacionado ao desenvolvimento de doenças osteolíticas, como a osteoporose e a periodontite apical, por participarem da reabsorção óssea por meio da degradação proteolítica de componentes da matriz orgânica. As cistatinas são inibidores naturais e reversíveis de cisteíno proteases. As fitocistatinas são cistatinas de plantas, sendo que algumas delas já foram produzidas de forma recombinante, como a CaneCPI-5 (derivada da cana-de-açúcar), a qual é foco deste estudo por ter apresentado potencial pró-osteogênico observado em estudo preliminar do nosso grupo de pesquisa. O objetivo deste estudo foi avaliar a citocompatibilidade e o efeito da CaneCPI-5 sobre a proliferação, migração, diferenciação osteo/odontogênica de células-tronco mesenquimais da polpa dental humana (hDPSCs). As hDPSCs expostas à CaneCPI- 5 e não expostas (controle) foram avaliadas quanto à viabilidade por meio do ensaio de alamarBlue, proliferação pelo ensaio de incorporação de bromodeoxiuridina (BrdU), migração por ensaio de transwell, deposição de precipitados inorgânicos pela coloração de vermelho de alizarina e quanto a atividade da enzima fosfatase alcalina tecidual inespecífica (TNAP). Os dados foram avaliados por ANOVA de uma ou duas vias, seguido do pós-teste de Tukey, ou Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn, ou Mann Whitney, com α = 0,05. A CaneCPI-5 foi citocompatível, induziu maior migração, proliferação, formação de nódulos mineralizados e atividade da TNAP em hDPSCs em relação ao controle. Assim, pode-se concluir que a CaneCPI-5 se constitui em molécula com potencial promissor para ser utilizada em terapias que visam o reparo/regeneração pulpar e periapical.