Caracterização fenotípica e molecular de isolados clínicos de Acinetobacter baumannii provenientes da fronteira oeste do Rio Grande do Sul

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Gollino, Gabriel de Paula
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNIPAMPA
Texto Completo: https://dspace.unipampa.edu.br/jspui/handle/riu/5498
Resumo: Acinetobacter baumannii é uma das principais espécies bacterianas relacionadas a infecções hospitalares, frequentemente associada às pneumonias por ventilação mecânica em UTIs. A resistência aos antimicrobianos em A. baumannii emergiu mundialmente nas últimas décadas atingindo níveis alarmantes, inclusive para os carbapenêmicos. No Brasil, as taxas de resistência a esta classe em A. baumannii é de aproximadamente 80%. O principal mecanismo associado à resistência aos carbapenêmicos é a produção de carbapenemases da Classe D de Ambler ou OXA-carbapenemases. Ao todo, seis famílias de OXA já foram relatadas em A. baumannii sendo a OXA-23 a mais prevalente em isolados do mundo todo. O objetivo deste estudo foi caracterizar isolados clínicos de A. baumannii resistentes aos carbapenêmicos (AbRC) provenientes da região da fronteira oeste do estado do Rio Grande do Sul quanto ao seu perfil de sensibilidade, prevalência de OXA-carbapenemases e determinar sua relação genética através de tipagem molecular. Os isolados foram provenientes de uma única instituição de saúde e coletados no período de cinco anos. A espécie A. baumannii foi identificada através da presença do gene blaOXA-51 e o perfil de sensibilidade foi determinado pela técnica de microdiluição em caldo. A detecção fenotípica da produção de carbapenemases foi realizada pelo teste de associação dos inibidores EDTA e ácido fenilborônico aos carbapenêmicos e pelo teste de Blue-Carba. A confirmação molecular foi realizada através da amplificação dos principais genes codificadores de carbapenemases por PCR. A relação genética entre os isolados de AbRC foi determinada pelas técnicas de REP-PCR e PFGE. No período do estudo, um total de 36 ARC foram isolados, provenientes principalmente de amostras clinicas do trato respiratório (66,6%). Além da resistência a todos os β-lactâmicos testados e ao ciprofloxacino, os isolados também apresentaram altos níveis de resistência à gentamicina (86,1%) e amicacina (61,1%). Por outro lado, todos foram sensíveis a polimixina B (CIMs ≤ 1 μg/mL). O gene blaOXA-23 foi detectado em 34 dos isolados de AbRC. A tipagem revelou a presença de três principais grupos geneticamente relacionados e de quatro linhagens clonais, duas presentes e prevalentes na instituição durante os quatro anos do estudo e duas com origem mais recente, em 2017. A partir dos resultados obtidos foi possível constatar uma elevada prevalência de isolados de AbRC produtores de OXA-23, com a disseminação e permanência de linhagens clonais na instituição. A resistência em A. baumannii não é um problema de saúde pública apenas em grandes centros de saúde do país, servindo de alerta sobre a necessidade de medidas mais efetivas de controle e prevenção. Ainda, os resultados deste estudo fornecem os primeiros dados epidemiológicos desta espécie nesta região do país, contribuindo para a construção de um panorama mais amplo sobre a resistência aos antimicrobianos em A. baumannii.
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spelling Ribeiro, Vanessa Bleyhttp://lattes.cnpq.br/8800974824747213http://lattes.cnpq.br/5948856637013748Gollino, Gabriel de Paula2021-04-19T17:51:32Z20212021-04-19T17:51:32Z2019GOLLINO, Gabriel de Paula. Caracterização fenotípica e molecular de isolados clínicos de Acinetobacter baumannii provenientes da fronteira oeste do Rio Grande do Sul. 65 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal do Pampa, Uruguaiana, 2019.https://dspace.unipampa.edu.br/jspui/handle/riu/5498Acinetobacter baumannii é uma das principais espécies bacterianas relacionadas a infecções hospitalares, frequentemente associada às pneumonias por ventilação mecânica em UTIs. A resistência aos antimicrobianos em A. baumannii emergiu mundialmente nas últimas décadas atingindo níveis alarmantes, inclusive para os carbapenêmicos. No Brasil, as taxas de resistência a esta classe em A. baumannii é de aproximadamente 80%. O principal mecanismo associado à resistência aos carbapenêmicos é a produção de carbapenemases da Classe D de Ambler ou OXA-carbapenemases. Ao todo, seis famílias de OXA já foram relatadas em A. baumannii sendo a OXA-23 a mais prevalente em isolados do mundo todo. O objetivo deste estudo foi caracterizar isolados clínicos de A. baumannii resistentes aos carbapenêmicos (AbRC) provenientes da região da fronteira oeste do estado do Rio Grande do Sul quanto ao seu perfil de sensibilidade, prevalência de OXA-carbapenemases e determinar sua relação genética através de tipagem molecular. Os isolados foram provenientes de uma única instituição de saúde e coletados no período de cinco anos. A espécie A. baumannii foi identificada através da presença do gene blaOXA-51 e o perfil de sensibilidade foi determinado pela técnica de microdiluição em caldo. A detecção fenotípica da produção de carbapenemases foi realizada pelo teste de associação dos inibidores EDTA e ácido fenilborônico aos carbapenêmicos e pelo teste de Blue-Carba. A confirmação molecular foi realizada através da amplificação dos principais genes codificadores de carbapenemases por PCR. A relação genética entre os isolados de AbRC foi determinada pelas técnicas de REP-PCR e PFGE. No período do estudo, um total de 36 ARC foram isolados, provenientes principalmente de amostras clinicas do trato respiratório (66,6%). Além da resistência a todos os β-lactâmicos testados e ao ciprofloxacino, os isolados também apresentaram altos níveis de resistência à gentamicina (86,1%) e amicacina (61,1%). Por outro lado, todos foram sensíveis a polimixina B (CIMs ≤ 1 μg/mL). O gene blaOXA-23 foi detectado em 34 dos isolados de AbRC. 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Ainda, os resultados deste estudo fornecem os primeiros dados epidemiológicos desta espécie nesta região do país, contribuindo para a construção de um panorama mais amplo sobre a resistência aos antimicrobianos em A. baumannii.Acinetobacter baumannii is one of the main bacterial species related to nosocomial infections, frequently associated with ventilator-associated pneumonia in ICUs. Antimicrobial resistance in A. baumannii has emerged worldwide in recent decades reaching alarming levels, including for carbapenems, with resistance rates achieving approximately 80% in Brazil. The main mechanism associated to carbapenem resistance is the production of Class D carbapenemases or OXA-carbapenemases. Six families of OXA enzymes have been reported in A. baumannii and OXA-23 is the most prevalent in isolates worldwide. The aim of this study was to characterize carbapenem-resistant A. baumannii (CRAb) clinical isolates from the western border region of Rio Grande do Sul state according to sensitivity profile, prevalence of OXA- carbapenemases and genetic relationship through molecular typing. The isolates were provided from a single health institution and they were collected from 2014 to 2018. The species A. baumannii was identified by the presence of the blaOXA-51 gene and the sensitivity profile was determined by broth microdilution. Phenotypic detection of carbapenemase production was performed by the association test of inhibitors EDTA and phenylboronic acid to carbapenems and by the Blue-Carba test. Molecular confirmation was performed by PCR amplification of the main carbapenemase encoding genes. The genetic relationship among CRAb isolates was determined by REP-PCR and PFGE. During the study period, a total of 36 carbapenem resistant Acinetobacter spp. were isolated, mainly from respiratory tract (66.6%). In addition to resistance to all β-lactams tested and ciprofloxacin, the isolates also showed high level resistance to gentamicin (86.1%) and amikacin (61.1%). On the other hand, all of them were sensitive to polymyxin B (MICs ≤ 1 μg/mL). The blaOXA-23 gene was detected in 34 CRAb isolates. Typing revealed the presence of three main genetically related groups and four clonal strains, two present and prevalent in the institution during the four years of the study and two of more recent origin, in 2017. From the results obtained it was possible to verify a high prevalence of OXA-23 producing AbRC isolates, with the dissemination and permanence of clonal strains in the institution. The resistance in A. baumannii is not a public health problem only in large health centers in the country, serving as a warning about the need for more effective measures for control and prevention. Furthermore, the results of this study provide the first epidemiological data of this species in this region of the country, contributing to the construction of a broader overview of antimicrobial resistance in A. baumannii.porUniversidade Federal do PampaMestrado Acadêmico em Ciências FarmaceuticasUNIPAMPABrasilCampus UruguaianaCNPQ::CIENCIAS DA SAUDETipagem molecularCarbapenemsMultiresistanceCarbapenemasesOXA-3Molecular typingCarbapenêmicosMultirresistênciaAcinetobacter baumanniiCaracterização fenotípica e molecular de isolados clínicos de Acinetobacter baumannii provenientes da fronteira oeste do Rio Grande do SulPhenotypic and molecular characterization of evidence of Acinetobacter baumannii from the western border of Rio Grande do Sulinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIPAMPAinstname:Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA)instacron:UNIPAMPAORIGINALGABRIEL DE PAULA GOLLINO ATE SET 2021.pdfGABRIEL DE PAULA GOLLINO ATE SET 2021.pdfapplication/pdf4430952https://repositorio.unipampa.edu.br/bitstreams/dfa800e5-4e98-4c2f-bf72-425a4b7b404d/downloadd43b47504683a83e4f611ca5b968a79dMD51trueAnonymousREAD2022-12-31LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81867https://repositorio.unipampa.edu.br/bitstreams/a1b62f59-a306-4806-a179-4516b8785589/downloadba21f2de58f2bed282863187a61580ffMD52falseAnonymousREADTEXTGABRIEL DE PAULA GOLLINO ATE SET 2021.pdf.txtGABRIEL DE PAULA GOLLINO ATE SET 2021.pdf.txtExtracted texttext/plain113947https://repositorio.unipampa.edu.br/bitstreams/788b706d-5e12-48d8-b559-63877e31a8c7/downloadf609dd51932404888198ff4f07828c20MD53falseAnonymousREAD2022-12-31riu/54982021-04-20 06:02:44.437open.accessoai:repositorio.unipampa.edu.br:riu/5498https://repositorio.unipampa.edu.brRepositório InstitucionalPUBhttp://dspace.unipampa.edu.br:8080/oai/requestsisbi@unipampa.edu.bropendoar:2021-04-20T06:02:44Repositório Institucional da UNIPAMPA - Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA)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