Utilização de diferentes diluidores e equipamentos na criopreservação do sêmen de curimatã (Prochilodus brevis)

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Main Author: Pinheiro, Joao Paulo Silva
Publication Date: 2014
Format: Master thesis
Language: por
Source: Repositório Institucional da UECE
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Summary: <div style="">Curimatã comum (Prochilodus brevis) é um peixe reofílico encontrado em alguns estados (Ceará, Piauí e Rio Grande do Norte) da região Nordeste do Brasil. No entanto, a pesca predatória e o impedimento, pelas barragens nos rios, da migração dessa espécie para a reprodução põe em risco a sobrevivência do P. brevis. Com isso, surge nos pesquisadores o interesse sobre a criopreservação do sêmen dessa espécie, tanto para a produção em aquicultura como para preservação de material genético em programas de conservação. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência de diferentes diluidores e equipamentos de congelação na criopreservação do sêmen de curimatã (P. brevis). Os machos (n=12) pertencentes ao plantel do Laboratório de Biotecnologia da Reprodução de Peixes foram induzidos hormonalmente com extrato hipofisário de carpa comum (3 mg kg-1 ) para a espermiação. Após 18h da indução, os animais foram sedados individualmente e realizada a coleta de sêmen, mensuração do comprimento e a pesagem dos mesmos. Depois da coleta seminal, realizou-se a análise objetiva da motilidade do sêmen com auxílio do Sperm Class Analyzer; foram também mensurados pH, volume, osmolaridade, fixadas alíquotas para morfologia e para concentração espermática, e em seguida, iniciado o processo de criopreservação. As amostras seminais (n=8) de cada animal foram diluídas em quatro diferentes tratamentos (glicose+dimetilsulfóxido-DMSO, glicose+metil glicol-MG, Beltsville Thawing SolutionBTS+DMSO e BTS+MG), envasadas em palhetas de 0,25 mL e submetidas a dois diferentes equipamentos de congelação: máquina de congelação programada e dry shipper. Após 10 dias, as amostras seminais foram descongeladas (25 ºC / 30s) e avaliadas quanto à cinética e à morfologia espermáticas com auxílio do software Sperm Class Analyzer. Os parâmetros físico-químicos (pH: 8,21 ± 0,27; osmolaridade: 250,29 ± 25,84 mOsm; concentração: 15,12 ± 2,77 x109 sptz mL-1 ) do sêmen in natura foram similares aos observados em outros estudos de Characiformes, portanto permitindo a criopreservação do sêmen. A glicose, quando usada como diluente em associação com o crioprotetor MG (glicose+MG), conferiu elevado percentual de espermatozoides móveis após congelação no equipamento dry shipper (76,88 ± 4,84%; P&gt;0,05; Coeficiente de Variação – C.V.: 17,8) e em máquina de congelação programada (70,95 ± 1,76%; P&gt;0,05; C.V.: 7,01) sendo superior (P&lt;0,05) aos demais tratamentos (glicose+DMSO: 23,64 ± 2,26% e 18,10 ± 2,87%; BTS+DMSO: 41,12 ± 3,14% e 37,58 ± 2,62; BTS+MG: 37,38 ± 5,06% e 50,86 ± 3,36%). Além disso, o tratamento glicose+MG conferiu velocidades espermáticas (VCL:79,52 ± 2,88 µm s-1 ; VSL:45,46 ± 3,01 µm s-1 ; VAP:67,92 ± 3,08 µm s -1 ; P&lt;0,05) superiores aos demais tratamentos estudados, e uma maior quantidade de espermatozoides normais (74,56 ± 0,77%; P&lt;0,05) foi observado quando o sêmen foi criopreservado utilizando a máquina de congelação programada. A anormalidade&nbsp;espermática mais encontrada foi a de cauda dobrada. Dessa forma, é recomendável a utilização de glicose+MG, em combinação com o dry shipper ou com a máquina de congelação programada para a criopreservação do sêmen de P. brevis. A utilização de uma máquina de congelação programada é mais recomendada, porque os resultados obtidos são mais uniformes do que utilizando o dry shipper. Palavras-chave: Dry shipper. Máquina de congelação programada. Peixe. Reprodução.</div>
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spelling Utilização de diferentes diluidores e equipamentos na criopreservação do sêmen de curimatã (Prochilodus brevis)Ciências veterinárias Criopreservação Curimatã comum (Prochilodus brevis) Peixe - Reprodução<div style="">Curimatã comum (Prochilodus brevis) é um peixe reofílico encontrado em alguns estados (Ceará, Piauí e Rio Grande do Norte) da região Nordeste do Brasil. No entanto, a pesca predatória e o impedimento, pelas barragens nos rios, da migração dessa espécie para a reprodução põe em risco a sobrevivência do P. brevis. Com isso, surge nos pesquisadores o interesse sobre a criopreservação do sêmen dessa espécie, tanto para a produção em aquicultura como para preservação de material genético em programas de conservação. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência de diferentes diluidores e equipamentos de congelação na criopreservação do sêmen de curimatã (P. brevis). Os machos (n=12) pertencentes ao plantel do Laboratório de Biotecnologia da Reprodução de Peixes foram induzidos hormonalmente com extrato hipofisário de carpa comum (3 mg kg-1 ) para a espermiação. Após 18h da indução, os animais foram sedados individualmente e realizada a coleta de sêmen, mensuração do comprimento e a pesagem dos mesmos. Depois da coleta seminal, realizou-se a análise objetiva da motilidade do sêmen com auxílio do Sperm Class Analyzer; foram também mensurados pH, volume, osmolaridade, fixadas alíquotas para morfologia e para concentração espermática, e em seguida, iniciado o processo de criopreservação. As amostras seminais (n=8) de cada animal foram diluídas em quatro diferentes tratamentos (glicose+dimetilsulfóxido-DMSO, glicose+metil glicol-MG, Beltsville Thawing SolutionBTS+DMSO e BTS+MG), envasadas em palhetas de 0,25 mL e submetidas a dois diferentes equipamentos de congelação: máquina de congelação programada e dry shipper. Após 10 dias, as amostras seminais foram descongeladas (25 ºC / 30s) e avaliadas quanto à cinética e à morfologia espermáticas com auxílio do software Sperm Class Analyzer. Os parâmetros físico-químicos (pH: 8,21 ± 0,27; osmolaridade: 250,29 ± 25,84 mOsm; concentração: 15,12 ± 2,77 x109 sptz mL-1 ) do sêmen in natura foram similares aos observados em outros estudos de Characiformes, portanto permitindo a criopreservação do sêmen. A glicose, quando usada como diluente em associação com o crioprotetor MG (glicose+MG), conferiu elevado percentual de espermatozoides móveis após congelação no equipamento dry shipper (76,88 ± 4,84%; P&gt;0,05; Coeficiente de Variação – C.V.: 17,8) e em máquina de congelação programada (70,95 ± 1,76%; P&gt;0,05; C.V.: 7,01) sendo superior (P&lt;0,05) aos demais tratamentos (glicose+DMSO: 23,64 ± 2,26% e 18,10 ± 2,87%; BTS+DMSO: 41,12 ± 3,14% e 37,58 ± 2,62; BTS+MG: 37,38 ± 5,06% e 50,86 ± 3,36%). Além disso, o tratamento glicose+MG conferiu velocidades espermáticas (VCL:79,52 ± 2,88 µm s-1 ; VSL:45,46 ± 3,01 µm s-1 ; VAP:67,92 ± 3,08 µm s -1 ; P&lt;0,05) superiores aos demais tratamentos estudados, e uma maior quantidade de espermatozoides normais (74,56 ± 0,77%; P&lt;0,05) foi observado quando o sêmen foi criopreservado utilizando a máquina de congelação programada. A anormalidade&nbsp;espermática mais encontrada foi a de cauda dobrada. Dessa forma, é recomendável a utilização de glicose+MG, em combinação com o dry shipper ou com a máquina de congelação programada para a criopreservação do sêmen de P. brevis. A utilização de uma máquina de congelação programada é mais recomendada, porque os resultados obtidos são mais uniformes do que utilizando o dry shipper. Palavras-chave: Dry shipper. Máquina de congelação programada. Peixe. Reprodução.</div><div style="">Common Curimatã (Prochilodus brevis) is a rheophilic fish found in some states (Ceará, Piauí and Rio Grande do Norte) of northeastern Brazil. However, overfishing and river dams, which prevent the migration of P. brevis of for reproduction, jeopardize the survival of this species. Accordingly, there is interest among researchers regarding P. brevis semen cryopreservation, both for aquacultural production and for the preservation of genetic material in conservation programs. This study aimed to evaluate the efficiency of different extenders and freezing equipment to freeze the semen of P. brevis. Males (n = 12) bred at Laboratory of Biotechnology of Reproduction Fish were hormonally induced with a pituitary extract from common carp (3 mg kg-1 ) to induce spermiation. After 18 h of induction, the animals were sedated, their lengths and weights the same were recorded, and semen was collected individually. After collection, an objective analysis of the motility of the semen was performed with the aid of Sperm Class Analyzer; the pH, volume, osmolality were measured and fixed rates for morphology and sperm concentration. For cryopreservation, the semen samples (n = 8) from each animal were diluted in four different treatments (glucose + DMSO-dimethyl sulfoxide, glucose + MG-methyl glycol, Beltsville Thawing Solution-BTS+ DMSO and BTS + MG) and packaged into 0.25 mL straws. Two different types of freezing equipment were used: a programmed freezing machine and a dry shipper. After 10 days, the semen samples were thawed (25 °C / 30 s) and evaluated with regard to kinetics and sperm morphology with the aid of the Sperm Class Analyzer software. The physico-chemical parameters (pH: 8.21 ± 0.27; osmolarity: 250.29 ± 25.84 mOsm; concentration: 15.12 ± 2.77 x109 sptz ml-1 ) of the semen in natura were similar to those observed in other studies of Characiformes, thus allowing semen cryopreservation. Glucose, when used as a diluent in association with the MG cryoprotectant (glucose + MG), resulted in a high percentage of mobile spermatozoa after dry shipper (76.88 ± 4.84%, P&gt; 0.05; Coefficient of Variation – C.V.: 17.8) and programmed freezing machine (70.95 ± 1.76%, P&gt; 0.05; C.V.: 7.01), and both were higher (P &lt;0.05) than with the other treatments (glucose + DMSO: 23.64 ± 2.26% and 18.10 ± 2.87%; BTS + DMSO: 41.12 ± 3.14% and 37.58 ± 2.62; BTS + MG: 37.38 ± 5.06% and 50.86 ± 3.36%). Furthermore, glucose + MG resulted in superior sperm velocities (VCL: 79.52 ± 2.88 µm s-1 ; VSL: 45.46 ± 3.01 µm s-1 ; APV: 67.92 ± 3.08 µm s-1 , P &lt;0.05) to other treatments, and a larger amount of normal spermatozoa (74.56 ± 0.77%; P&lt;0,05) was observed when the semen was cryopreserved using the programmed freezing machine. However, bent tail was an observed abnormality. Thus, glucose + MG in combination with dry shipper or programmed freezing machine is recommended for P. brevis semen cryopreservation.&nbsp;&nbsp;The use of the programmed freezing machine is preferred because the results were more uniform than when using the dry shipper. Keywords: Dry shipper. Programmed freezing machine. Fish. Reproduction.</div>Universidade Estadual do CearáCARMINDA SANDRA BRITO SALMITO VANDERLEYPinheiro, Joao Paulo Silva2019-05-06T13:23:58Z2014info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=83565info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UECEinstname:Universidade Estadual do Cearáinstacron:UECE2019-05-06T13:23:58Zoai:uece.br:83565Repositório InstitucionalPUBhttps://siduece.uece.br/siduece/api/oai/requestopendoar:2019-05-06T13:23:58Repositório Institucional da UECE - Universidade Estadual do Cearáfalse
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description <div style="">Curimatã comum (Prochilodus brevis) é um peixe reofílico encontrado em alguns estados (Ceará, Piauí e Rio Grande do Norte) da região Nordeste do Brasil. No entanto, a pesca predatória e o impedimento, pelas barragens nos rios, da migração dessa espécie para a reprodução põe em risco a sobrevivência do P. brevis. Com isso, surge nos pesquisadores o interesse sobre a criopreservação do sêmen dessa espécie, tanto para a produção em aquicultura como para preservação de material genético em programas de conservação. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência de diferentes diluidores e equipamentos de congelação na criopreservação do sêmen de curimatã (P. brevis). Os machos (n=12) pertencentes ao plantel do Laboratório de Biotecnologia da Reprodução de Peixes foram induzidos hormonalmente com extrato hipofisário de carpa comum (3 mg kg-1 ) para a espermiação. Após 18h da indução, os animais foram sedados individualmente e realizada a coleta de sêmen, mensuração do comprimento e a pesagem dos mesmos. Depois da coleta seminal, realizou-se a análise objetiva da motilidade do sêmen com auxílio do Sperm Class Analyzer; foram também mensurados pH, volume, osmolaridade, fixadas alíquotas para morfologia e para concentração espermática, e em seguida, iniciado o processo de criopreservação. As amostras seminais (n=8) de cada animal foram diluídas em quatro diferentes tratamentos (glicose+dimetilsulfóxido-DMSO, glicose+metil glicol-MG, Beltsville Thawing SolutionBTS+DMSO e BTS+MG), envasadas em palhetas de 0,25 mL e submetidas a dois diferentes equipamentos de congelação: máquina de congelação programada e dry shipper. Após 10 dias, as amostras seminais foram descongeladas (25 ºC / 30s) e avaliadas quanto à cinética e à morfologia espermáticas com auxílio do software Sperm Class Analyzer. Os parâmetros físico-químicos (pH: 8,21 ± 0,27; osmolaridade: 250,29 ± 25,84 mOsm; concentração: 15,12 ± 2,77 x109 sptz mL-1 ) do sêmen in natura foram similares aos observados em outros estudos de Characiformes, portanto permitindo a criopreservação do sêmen. A glicose, quando usada como diluente em associação com o crioprotetor MG (glicose+MG), conferiu elevado percentual de espermatozoides móveis após congelação no equipamento dry shipper (76,88 ± 4,84%; P&gt;0,05; Coeficiente de Variação – C.V.: 17,8) e em máquina de congelação programada (70,95 ± 1,76%; P&gt;0,05; C.V.: 7,01) sendo superior (P&lt;0,05) aos demais tratamentos (glicose+DMSO: 23,64 ± 2,26% e 18,10 ± 2,87%; BTS+DMSO: 41,12 ± 3,14% e 37,58 ± 2,62; BTS+MG: 37,38 ± 5,06% e 50,86 ± 3,36%). Além disso, o tratamento glicose+MG conferiu velocidades espermáticas (VCL:79,52 ± 2,88 µm s-1 ; VSL:45,46 ± 3,01 µm s-1 ; VAP:67,92 ± 3,08 µm s -1 ; P&lt;0,05) superiores aos demais tratamentos estudados, e uma maior quantidade de espermatozoides normais (74,56 ± 0,77%; P&lt;0,05) foi observado quando o sêmen foi criopreservado utilizando a máquina de congelação programada. A anormalidade&nbsp;espermática mais encontrada foi a de cauda dobrada. Dessa forma, é recomendável a utilização de glicose+MG, em combinação com o dry shipper ou com a máquina de congelação programada para a criopreservação do sêmen de P. brevis. A utilização de uma máquina de congelação programada é mais recomendada, porque os resultados obtidos são mais uniformes do que utilizando o dry shipper. Palavras-chave: Dry shipper. Máquina de congelação programada. Peixe. Reprodução.</div>
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