Identificação de inibidores de efluxo em candida albicans através de uma estratégia de reposicionamento de fármacos

• Main Author: Marques, Débora
• Publication Date: 2025
• Format: Master thesis
• Language: por
• Source: Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
• Download full: http://hdl.handle.net/10362/182168
• topic: C. albicans; Antimicrobial resistance; Antifungal adjuvants; Efflux pumps; Drug repurposing; Saúde

Resumo: Candida albicans é responsável por infeções fúngicas nosocomiais associadas a uma elevada morbilidade e mortalidade. A resistência aos fármacos antifúngicos, nomeadamente à classe dos azóis, está a aumentar pelo que é urgente desenvolver novas alternativas terapêuticas. A resistência aos fármacos azóis pode resultar de vários mecanismos, incluindo alterações do alvo e sobre-expressão de genes que codificam bombas de efluxo. A utilização de inibidores do efluxo pode aumentar a concentração intracelular do antifúngico e, assim, reduzir ou impedir o desenvolvimento da resistência. O reposicionamento de fármacos é uma abordagem que pode ser usada para reduzir o tempo e o custo associados ao desenvolvimento de novos fármacos, incluindo inibidores de efluxo. Neste trabalho, utilizou-se uma estratégia de reposicionamento in silico para identificar potenciais alvos terapêuticos em C. albicans, envolvidos no transporte membranar. Para o efeito, utilizou-se a base de dados DrugBank para identificar proteínas-alvo homólogas associadas a fármacos aprovados existentes, gerando uma lista com um total de 245 alvos preditivos associados a 607 fármacos em C. albicans. Selecionaram-se 59 fármacos representativos de cada superclasse química para avaliação da sua atividade in vitro contra a estirpe de referência C. albicans ATCC 90028. Além disso, avaliou-se também o potencial efeito adjuvante dos fármacos na atividade do fluconazol e do brometo de etídio, ambos substratos de bombas de efluxo. Finalmente, avaliou-se a atividade inibitória de efluxo dos fármacos candidatos através da deteção fluorométrica em tempo real da acumulação de brometo de etidio. O fármaco miltefosina apresentou a concentração mínima inibitória (CMI) mais baixa (2 mg/L), enquanto amlodipina e procainamida demonstraram um potencial efeito adjuvante, diminuindo pelo menos quatro vezes a CMI do fluconazol. Os ensaios fluorométricos revelaram a amlodipina, a fluvoxamina e a fluoxetina como potenciais inibidores de efluxo em C. albicans. No futuro, estes fármacos poderão contribuir para a investigação e desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas que possam ser utilizadas no combate à resistência antifúngica em C. albicans.