Avaliação da expressão da Cox-2 em tumores mamários de cadela

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Main Author: Marques, Daniela Cristina Sobreiro
Publication Date: 2013
Format: Master thesis
Language: por
Source: Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
Download full: http://hdl.handle.net/10400.5/6222
Summary: Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária
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spelling Avaliação da expressão da Cox-2 em tumores mamários de cadelaCiclooxigenase-2tumor mamáriocadelacyclooxygenase-2mammary tumourbitchDissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaA ciclooxigenase-2 (COX-2) é uma proteína que se encontra envolvida na oncogénese e na inflamação, tendo sido demonstrada a sua sobrexpressão em diversas neoplasias humanas e animais. Nos tumores mamários esta enzima está associada a indicadores de pior prognóstico, tanto na mulher como na cadela. Adicionalmente, a utilização de fármacos inibidores da COX-2 demonstrou uma diminuição da incidência e da capacidade metastática em mulheres portadoras de cancro da mama. Também nos tumores mamários de cadela existe a evidência de que a utilização destes fármacos tem efeitos benéficos na melhoria da qualidade de vida e no aumento do tempo de sobrevivência. O objetivo principal deste estudo foi avaliar a expressão da COX-2 em neoplasias mamárias caninas e a sua associação com diversos parâmetros clinico-patológicos, de forma a investigar a importância desta proteína como um futuro alvo terapêutico. A expressão da COX-2 foi avaliada em 21 amostras de tumores por imunohistoquímica (IHQ), utilizando dois anticorpos anti-COX-2. Como controlo positivo foi utilizado útero de cadela com piómetra. A percentagem de células positivas nos tumores analisados foi classificada semiquantitativamente do seguinte modo: 0 - <10%; 1 - 10-25%; 2 - 26-50%; 3 – 51-75%; 4 – 76- 100%. A classificação da intensidade de marcação foi distribuída por quatro categorias: 1 - discreta (+); 2 - moderada (++); 3 - intensa (+++); 4 - muito intensa (++++). Tendo em conta estes dois parâmetros, foi atribuída uma pontuação a cada neoplasia resultante da soma dos dois valores analisados. A IHQ realizada com o clone 33 revelou que a grande maioria dos tumores da amostra (85,7%) demonstraram ter menos de 10% de células positivas e intensidade de marcação 3 (+++), resultando numa pontuação final de 3. Ainda com este clone foram classificados dois tumores com pontuação 5 (1 – 10-25%; 4 - ++++) e um com 6 (2 – 26-50%; 4 - ++++). O padrão de marcação observado foi de tipo citoplasmático difuso e perinuclear. Relativamente ao clone SP21, 95,2% das neoplasias demonstraram positividade de nível 4 (76-100%) e intensidade entre 3 (+++) e 4 (++++), resultando na atribuição de pontuações de 7 e 8, respectivamente. Com este clone foi observado tanto um padrão de marcação membranar como um padrão citoplasmático difuso e perinuclear. Este último foi comum aos dois anticorpos e observado nos mesmos tumores, correspondendo a neoplasias menos diferenciadas. No presente estudo, a expressão da COX-2 revelou associação estatisticamente significativa com o tamanho e grau de diferenciação dos tumores. Será necessário mais investigação nesta área de modo a estabelecer quais os anticorpos, protocolos e respectivos padrões de marcação que se correlacionam inequivocamente com níveis elevados da expressão da COX-2, para que inibidores desta proteína possam ser testados como terapia.ABSTRACT - Evaluation the expression of COX-2 in canine mammary tumours - Cyclooxygenase-2 (COX-2) is a protein involved in oncogenesis and inflammation and its overexpression has been demonstrated in several human and animal neoplasias. In mammary tumours this enzyme is associated with indicators of poor prognosis, in both human and canine species. Additionally, the use of drugs inhibitors of COX-2 showed reduction in incidence and metastatic capability in women with breast cancer. Also in canine mammary tumours, there is evidence that the use of these drugs have beneficial effects in improving the quality of life and increasing survival time. The main purpose of this study was to evaluate COX-2 expression in canine mammary neoplasias and its association with clinicopathological parameters, in order to investigate the importance of this protein as a future therapeutic target. The expression of COX-2 was evaluated in 21 tumour samples by immunohistochemistry (IHQ), using two anti-COX-2 antibodies. Canine uterus with pyometra was used as positive control. The percentage of cellular positivity in each tumour was classified semi-quantitatively as follows: 0 - <10%; 1 - 10%-25%; 2 - 26-50%; 3 – 51-75%; 4 – 76-100%. The grading of intensity of the labelling was distributed by four categories: 1 - discrete (+); 2 - moderate (++); 3 - intense (+++); 4 - very intense (++++). Given these two parameters a score was assigned to each tumour, resulting from the sum of the two values. IHQ with clone 33 revealed that the majority of tumour samples (85,7%), had less than 10% of positive cells, and a labelling intensity of 3 (+++), resulting in a final score of 3. Also with this clone two tumours were classified as 5 (1 – 10-25%; 4 - ++++), and one as 6 (2 - 26- 50%; 4 - ++++). The labelling observed was diffuse cytoplasmic and perinuclear. With clone SP21, 95,2% of the neoplasias revealed positivity in 76-100% of the cells, and intensity between 3 (+++) and 4 (++++), resulting in final scores of 7 and 8. With this clone both cell membrane as diffuse cytoplasmic and perinuclear labelling were observed. This last pattern was common in the same tumours with both antibodies, corresponding to poorly differentiated neoplasias. In the present study, COX-2 expression revealed a statistically significant association with tumour size and grading. More investigation in this field is required, in order to definitively establish a protocol and labelling pattern that unequivocally correlate with the levels of COX-2 expression, so that COX-2 inhibitors can be tested for therapeutic benefits.Universidade de Lisboa. Faculdade de Medicina VeterináriaPeleteiro, Maria da Conceição da Cunha e VasconcelosFerreira, Fernando António da CostaRepositório da Universidade de LisboaMarques, Daniela Cristina Sobreiro2013-12-06T13:25:35Z2013-11-222013-11-22T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.5/6222TID:201265109porMarques, D.C.S. (2013). Avaliação da expressão da Cox-2 em tumores mamários de cadela. Dissertação de Mestrado. Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina Veterinária, Lisboa.info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)instname:FCCN, serviços digitais da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologiainstacron:RCAAP2025-03-17T15:19:41Zoai:repositorio.ulisboa.pt:10400.5/6222Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireinfo@rcaap.ptopendoar:https://opendoar.ac.uk/repository/71602025-05-29T03:40:19.553999Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP) - FCCN, serviços digitais da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologiafalse
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