Efeito do 3-bromopiruvato na pluripotência de mESC

• Main Author: Gomes, Andreia Marques
• Publication Date: 2012
• Format: Master thesis
• Language: por
• Source: Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
• Download full: http://hdl.handle.net/10773/9686
• topic: Biologia molecular; Células estaminais - Embriões; Metabolismo celular; Patologia celular; Tumores

As células estaminais embrionárias são caracterizadas pela sua capacidade de auto-renovação bem como pelo seu potencial de diferenciação em pluripotência. Estudos recentes demonstraram que as células estaminais pluripotentes possuem um baixo número de mitocôndrias e baixos níveis fosforilação oxidativa, utilizando preferencialmente a glicólise como fonte principal de ATP. Esta característica é partilhada com algumas células cancerígenas. O 3-bromopiruvato é um agente alquililante com efeitos antitumorais em vários modelos de tumores. Assim, o objectivo deste trabalho foi estudar o efeito do 3-bromopiruvato em células estaminais embrionárias de murganho. Para isso, foram usados estudos in vitro em células estaminais embrionárias de murganho (mESCs) para avaliar o efeito deste composto na pluripotência (através de marcadores como o Nanog e o Oct-4 e a fosfatase alcalina), na viabilidade e na actividade metabólica celular. Foi estudada a expressão das enzimas glicolíticas e a detecção do lactato extracelular bem como a actividade mitocondrial através da determinação do potencial membranar mitocondrial. Foram ainda quantificados os conteúdos em nucleótidos de adenosinas. Neste estudo, mostrou-se que o estado indiferenciado das células estaminais foi afectado sem no entanto perderem a viabilidade. Além disso, a glicólise e a mitocôndria pareceram também não ser afectadas com o tratamento de 3-bromopiruvato. Assim, apesar de afectar a pluripotência, o 3-bromopiruvato não afectou o metabolismo destas células pelo menos nos parâmetros analisados. Serão necessárias mais experiências para complementar este estudo de modo a perceber o efeito global do 3-bromopiruvato no metabolismo e pluripotência das células estaminais embrionárias de murganho.