Export Ready — 

Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose

Bibliographic Details
Main Author: Luís, Tiago Miguel Baeta
Publication Date: 2019
Format: Master thesis
Language: por
Source: Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
Download full: http://hdl.handle.net/10451/41390
Summary: Tese de mestrado, Microbiologia Aplicada, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019
id RCAP_00ea6de81bf5027e4d99bae5601b1c77
oai_identifier_str oai:repositorio.ulisboa.pt:10451/41390
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
repository_id_str https://opendoar.ac.uk/repository/7160
spelling Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de ApoptoseVírus da raivaRABVglicoproteína Gnucleoproteína NCVS-11; CVS-27Genótipo 1EBLV-1Genótipo 5apoptoseTeses de mestrado - 2019Departamento de Biologia VegetalTese de mestrado, Microbiologia Aplicada, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019A Raiva é uma zoonose causada por um vírus neurotrópico pertencente ao género Lyssavirus, família Rhabdoviridae, ordem Mononegavirales. Este vírus infecta todas as espécies de animais de sangue quente. Este trabalho teve como principal objectivo avaliar a influência da glicoproteína G do vírus da raiva na replicação em células de neuroblastoma murino Neuro2a cultivadas in vitro, assim como na indução da apoptose. Foram comparados dois genótipos distintos, genótipo 1 (CVS-11, estirpe fixa, atenuada in vitro por passagens seriadas em culturas celulares BHK-21, e CVS-27, estirpe fixa, atenuada in vivo por passagens seriadas em cérebro de ratinho lactante) e genótipo 5 (EBLV-1, estirpe selvagem de quirópteros isolada em células de neuroblastoma). A cinética de replicação dos vírus em estudo foi avaliada por transcrição reversa seguida de PCR quantitativo (RTqPCR), e expressão das proteínas N (precoce) e G (tardia) por imunofluorescência. A apoptose foi avaliada através da visualização em gel das alterações do DNA celular sujeito a electroforese. Foram encontradas diferenças significativas na expressão das proteínas N e G, quer entre as duas estirpes fixas estudadas, quer entre as estirpes fixas e a estirpe isolada a partir de morcegos. A expressão de proteína N mostrou-se mais precoce em CVS-27 que em CVS-11, sugerindo que o ciclo replicativo da primeira estirpe seja mais curto que o da última. A expressão de G foi observada mais tardiamente, estando em conformidade com o facto de que a sua expressão só ocorre no final do ciclo replicativo. A expressão das proteínas N e G de EBLV-1 foi observada apenas às 24 h p.i., com fraca intensidade de fluorescência e com um número mais reduzido de células infectadas, o que evidencia uma evolução de infecção mais lenta e gradual desta estirpe na linha celular utilizada neste trabalho quando comparada com as estirpes fixas. No seu todo, estes resultados sugerem que a duração do ciclo replicativo depende da susceptibilidade e permissibilidade do sistema celular à infecção pelas diferentes estirpes de vírus da raiva. Os ensaios de apoptose induzida pela infecção destes Lyssavírus, embora preliminares, sugerem que a estirpe EBLV-1 seja a mais apoptótica das estirpes estudadas.Rabies is a zoonosis caused by a neurotropic virus belonging to the genus Lyssavirus, family Rhabdoviridae, order Mononegavirales. This virus infects all species of warmblooded animals. This study aimed to evaluate the influence of rabies virus glycoprotein G on the viral replication in in vitro cultured murine neuroblastoma cells, as well as on the induction of apoptosis. Two distinct genotypes were compared, genotype 1 (CVS-11, fixed strain, attenuated by serial passages in BHK-21 cell cultures, and CVS-27, fixed strain, attenuated in vivo by serial passages in lactating mouse brain) and genotype 5 (EBLV-1, wild chiropteran strain isolated on neuroblastoma cells). The replication kinetics of the studied viruses were evaluated by reverse transcription followed by quantitative PCR (RT-qPCR), and expression of N (early) and G (late) proteins by immunofluorescence. Apoptosis was assessed by gel visualization of cell DNA changes. Significant differences were found in the expression of N and G proteins, both between the two fixed strains studied and between the fixed strains and the strain isolated from bats. Protein N expression was earlier in CVS-27 than in CVS-11, suggesting that the replicative cycle of the first strain is shorter than the last. G expression was observed later, in line with the fact that its expression only occurs at the end of the replicative cycle. The expression of EBLV-1 N and G proteins was observed only at 24 h pi, with low fluorescence intensity and with a smaller number of infected cells, which shows a slower and more gradual evolution of this strain in the cell line used in this work when compared to fixed strains. Overall, these results suggest that the duration of the replicative cycle depends on the susceptibility and permissibility of the cellular system to infection by different strains of rabies virus. Apoptosis assays induced by infection of these Lyssaviruses, although preliminary, suggest that the EBLV-1 strain is the most apoptotic of the studied strains.Fevereiro, Miguel, 1950-Caeiro, Filomena, 1950-Repositório da Universidade de LisboaLuís, Tiago Miguel Baeta2020-01-24T15:36:15Z201920192019-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10451/41390TID:202398714porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)instname:FCCN, serviços digitais da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologiainstacron:RCAAP2025-03-17T14:15:17Zoai:repositorio.ulisboa.pt:10451/41390Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireinfo@rcaap.ptopendoar:https://opendoar.ac.uk/repository/71602025-05-29T03:06:50.732954Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP) - FCCN, serviços digitais da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologiafalse
dc.title.none.fl_str_mv Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
title Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
spellingShingle Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
Luís, Tiago Miguel Baeta
Vírus da raiva
RABV
glicoproteína G
nucleoproteína N
CVS-11; CVS-27
Genótipo 1
EBLV-1
Genótipo 5
apoptose
Teses de mestrado - 2019
Departamento de Biologia Vegetal
title_short Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
title_full Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
title_fullStr Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
title_full_unstemmed Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
title_sort Papel da Glicoproteína G do vírus da Raiva na Indução de Apoptose
author Luís, Tiago Miguel Baeta
author_facet Luís, Tiago Miguel Baeta
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Fevereiro, Miguel, 1950-
Caeiro, Filomena, 1950-
Repositório da Universidade de Lisboa
dc.contributor.author.fl_str_mv Luís, Tiago Miguel Baeta
dc.subject.por.fl_str_mv Vírus da raiva
RABV
glicoproteína G
nucleoproteína N
CVS-11; CVS-27
Genótipo 1
EBLV-1
Genótipo 5
apoptose
Teses de mestrado - 2019
Departamento de Biologia Vegetal
topic Vírus da raiva
RABV
glicoproteína G
nucleoproteína N
CVS-11; CVS-27
Genótipo 1
EBLV-1
Genótipo 5
apoptose
Teses de mestrado - 2019
Departamento de Biologia Vegetal
description Tese de mestrado, Microbiologia Aplicada, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019
publishDate 2019
dc.date.none.fl_str_mv 2019
2019
2019-01-01T00:00:00Z
2020-01-24T15:36:15Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10451/41390
TID:202398714
url http://hdl.handle.net/10451/41390
identifier_str_mv TID:202398714
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
instname:FCCN, serviços digitais da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologia
instacron:RCAAP
instname_str FCCN, serviços digitais da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologia
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
collection Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP)
repository.name.fl_str_mv Repositórios Científicos de Acesso Aberto de Portugal (RCAAP) - FCCN, serviços digitais da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologia
repository.mail.fl_str_mv info@rcaap.pt
_version_ 1833601597520740352

Similar Items