Detection of fluoroquinolone resistance by mutation in gyrA gene of Campylobacter spp. isolates from broiler and laying (Gallus gallus domesticus) hens, from Rio de Janeiro State, Brazil

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Main Author: Frasão, Beatriz da Silva
Publication Date: 2015
Other Authors: Medeiros, Valéria de Mello, Barbosa, André Victor, Aguiar, Waldemir Silva, Santos, Felipe Faccini dos, Abreu, Dayse Lima da Costa, Clementino, Maysa Beatriz Mandetta, Aquino, Maria Helena Cosendey de
Format: Article
Language: eng
Source: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
DOI: http://dx.doi.org/10.1590/0103-8478cr20141712
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http://dx.doi.org/10.1590/0103-8478cr20141712
Summary: As aves são consideradas o principal reservatório de Campylobacter spp., um importante patógeno para humanos e muitos estudos têm relatado uma rápida seleção de cepas resistentes às fluoroquinolonas após o uso destes antimicrobianos na produção avícola e na medicina humana. O principal mecanismo de resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter consiste na mutação na Região Determinantes de Resistência às Quinolonas (RDRQ) do gene gyrA, que codifica para a subunidade A da enzima DNA girase, alvo das fluoroquinolonas. O objetivo deste estudo foi investigar a mutação na RDRQ do gene gyrA em cepas de Campylobacter previamente isolados de carcaças de frangos de corte e fezes de galinhas poedeiras. Foram selecionadas 38 cepas de C. jejunie 19 cepas de C. coli(n=57), previamente caracterizadas como resistentes à ciprofloxacina e enrofloxacina, pelo método da difusão em disco e pela determinação da concentração inibitória mínima. Para detecção da mutação, foi utilizado sequenciamento direto de um fragmento de 454pb da RDRQ do gene gyrA gerado por PCR. Todas as cepas apresentaram a mutação na RDRQ do gene gyrA no códon 86 (Tre-86-Ile), que confere resistência às fluoroquinolonas e outras mutações silenciosas foram observadas. A caracterização genotípica da resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter confirmou a prévia detecção fenotípica dessa resistência e a mutação Tre-86-Ile foi observada na totalidade das amostras, comprovando ser esta a mutação predominante em cepas de C. jejunie C. coli resistentes à enrofloxacina e ciprofloxacina.
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O principal mecanismo de resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter consiste na mutação na Região Determinantes de Resistência às Quinolonas (RDRQ) do gene gyrA, que codifica para a subunidade A da enzima DNA girase, alvo das fluoroquinolonas. O objetivo deste estudo foi investigar a mutação na RDRQ do gene gyrA em cepas de Campylobacter previamente isolados de carcaças de frangos de corte e fezes de galinhas poedeiras. Foram selecionadas 38 cepas de C. jejunie 19 cepas de C. coli(n=57), previamente caracterizadas como resistentes à ciprofloxacina e enrofloxacina, pelo método da difusão em disco e pela determinação da concentração inibitória mínima. Para detecção da mutação, foi utilizado sequenciamento direto de um fragmento de 454pb da RDRQ do gene gyrA gerado por PCR. Todas as cepas apresentaram a mutação na RDRQ do gene gyrA no códon 86 (Tre-86-Ile), que confere resistência às fluoroquinolonas e outras mutações silenciosas foram observadas. A caracterização genotípica da resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter confirmou a prévia detecção fenotípica dessa resistência e a mutação Tre-86-Ile foi observada na totalidade das amostras, comprovando ser esta a mutação predominante em cepas de C. jejunie C. coli resistentes à enrofloxacina e ciprofloxacina.Poultry are considered to be the main reservoir of Campylobacter spp. bacteria, an important pathogen for humans. Many studies have reported a rapid selection of fluoroquinolone-resistant strains following the widespread use of these antimicrobials in poultry production and human medicine. The main mechanism of fluoroquinolone resistance in Campylobacter is a mutation in the Quinolone Resistance Determinant Region (QRDR) in the gyrA gene, which codes for the subunit of the enzyme DNA gyrase, the target for fluoroquinolone. The aim of this study was to investigate the mutation in QRDR in the gyrA gene of Campylobacter strains previously isolated from broiler carcasses and feces of laying hens. Thirty-eight strains of C. jejuni and 19 C. coli strains (n=57), previously characterized as resistant to ciprofloxacin and enrofloxacin by the disk diffusion method and minimum inhibitory concentration (MIC), were selected. For detection of the mutation, a fragment of 454pb QRDR in the gyrA gene was used for direct sequencing. All strains presented the QRDR mutation in the gyrA gene at codon 86 (Thr-86-Ile), which confers resistance to fluoroquinolones. Other known silent mutations were observed. This genotypic characterization of fluoroquinolone resistance in Campylobacter strains has confirmed the prior phenotypic detection of the resistance. The Thr-86-Ile mutation was observed in all samples confirming that this is the predominant mutation in enrofloxacin and ciprofloxacin resistant strains of C. jejuni and C. coli.Universidade Federal Fluminense. Departamento de Tecnologia de Alimentos. Niterói, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Química. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Universidade Federal Fluminense. Instituto Biomédico. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Niterói, RJ, Brasil.Universidade Federal Fluminense. Departamento de Tecnologia de Alimentos. Niterói, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Química. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Universidade Federal Fluminense. Departamento de Saúde Coletiva Veterinária e Saúde Pública. Niterói, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Química. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Universidade Federal Fluminense. Departamento de Saúde Coletiva Veterinária e Saúde Pública. Niterói, RJ, Brasil.engUniversidade Federal de Santa MariaEnrofloxacinaCiprofloxacinaAvesC. jejuniC. coliEnrofloxacinCiprofloxacinPoultryC. jejuniC. coliAntibacterianosCampylobacterDNA GiraseAves DomésticasDetection of fluoroquinolone resistance by mutation in gyrA gene of Campylobacter spp. isolates from broiler and laying (Gallus gallus domesticus) hens, from Rio de Janeiro State, BrazilDetecção de resistência às fluoroquinolonas através da mutação no gene gyrA em Campylobacter spp. isolados de frangos de corte e galinhas (Gallus gallus domesticus) poedeiras, no Estado do Rio de Janeiro, Brasilinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82354https://arca.fiocruz.br/bitstreams/3fb6f25c-6574-4a12-aff6-4735a4bf1fc1/download8b4c200b4e10021c5683c6ccaba07169MD51falseAnonymousREADTEXTCienc_Rural_45_2013-2018.pdf.txtCienc_Rural_45_2013-2018.pdf.txtExtracted texttext/plain28380https://arca.fiocruz.br/bitstreams/8cb1e6d6-4d66-4318-aaff-3a040bf4000b/downloaddd0fc8a876a3f4728ba1ffc6a61259f5MD57falseAnonymousREADORIGINALCienc_Rural_45_2013-2018.pdfCienc_Rural_45_2013-2018.pdfapplication/pdf374912https://arca.fiocruz.br/bitstreams/c6d9d7ef-566e-4546-a1be-7c58a7d886e8/download611620a954de182ced0f94f87bda0f86MD54trueAnonymousREADTHUMBNAILCienc_Rural_45_2013-2018.pdf.jpgCienc_Rural_45_2013-2018.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg5114https://arca.fiocruz.br/bitstreams/c81d0dab-9f46-485a-a928-24406a48d451/download384a98d78ae5022d73980d189dfa84bcMD58falseAnonymousREADicict/121252025-07-29 22:46:29.725open.accessoai:arca.fiocruz.br:icict/12125https://arca.fiocruz.brRepositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352025-07-30T01:46:29Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - 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