Validação de sistema sindrômico multiplex para diagnóstico molecular de meningites bacterianas

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Evangelista, Patricia Salles Estrela
• Orientador(a): Setti, Joao Antonio Palma
• Banca de defesa: Couto, Gustavo Henrique , Setti, Joao Antonio Palma , Berte, Siliane Denise
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Tecnológica Federal do Paraná; Curitiba
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Automação - Diagnóstico; Meningite cerebrospinal; Meningite - Diagnóstico molecular; Automation - Diagnosis; Meningitis, Cerebrospinal
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA BIOMEDICA
• Link de acesso: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/25762

Estima-se que haja anualmente mais de 1,2 milhões de casos de meningite bacteriana em todo o mundo, com coeficientes de incidência e letalidade que variam de acordo com a região, país, faixa etária e agente etiológico. No Brasil, o número de casos referentes às meningites de origem bacteriana é preocupante, pois além de sua rápida evolução e letalidade, representam em número de casos o segundo maior número de registros, com uma representatividade de 27,4%, de acordo com os dados de vigilância epidemiológica. Assim, considerando que a identificação etiológica e o diagnóstico precoce são essenciais para a definição de tratamentos antimicrobianos adequados, instituição de medidas de controle e até mesmo para o monitoramento do perfil epidemiológico da doença, e que, durante a pesquisa bibliográfica, foi identificado a existência de uma quantidade ordinária de plataformas totalmente automatizadas disponíveis no mercado, em conjunto com uma ausência de compatibilidade entre plataformas e painéis moleculares multiplex. O presente trabalho teve como objetivo validar o painel molecular multiplex XGEN MULTI MB (Fab.: Mobius LifeScience, Ref. XG-MB-MB-24) para uso em conjunto com a plataforma totalmente automatizada BD MAX™ System (Fab.: BD Diagnostics, Ref. BD MAX™ System), formando assim um sistema sindrômico multiplex utilizado para diagnóstico molecular de meningites bacterianas, denominado ao longo do trabalho como SSM MB. Como layout de validação, foram consideradas seis etapas de ensaios analíticos, compostas por ensaios de robustez, sensibilidade analítica, especificidade analítica, precisão e exatidão/acurácia, somando um total de 162 testes realizados. Para realização dos ensaios, foram utilizadas amostras previamente conhecidas como negativas para os patógenos em análise, em conjunto com padrões sintéticos de concentração conhecida, específicos para detecção dos alvos detectados no painel molecular multiplex XGEN MULTI MB. Após a avaliação dos resultados obtidos verificou-se que o sistema sindrômico multiplex SSM MB apresentou: curvas de amplificação em formato exponencial, resultados de detecção válidos e valores de fluorescência de acordo com o padrão observado na rotina utilizando um ganho de 80 (ensaios de robustez); capacidade de detectar os patógenos Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae e Haemophilus influenzae até uma concentração mínima de aproximadamente 13 cópias/µL (ensaios de sensibilidade analítica); capacidade de realizar detecções apenas do patógeno alvo, em canal específico, sem indícios de interferência de fluorescência em outros canais ópticos (ensaios de especificidade analítica); capacidade de detectar medições sucessivas de um mesmo analito, em condições operacionais inalteradas e em condições operacionais distintas, com resultados concordantes e dentro dos critérios de aceite proposto (ensaios de precisão); capacidade de detectar valores de medição próximos aos resultados aceitos como verdadeiramente corretos (ensaios de exatidão/acurácia). Deste modo, concluiu-se que o sistema sindrômico multiplex SSM MB atendeu aos objetivos previamente propostos, com resultados considerados como satisfatórios em todas as etapas de ensaio realizadas. Tanto que, posteriormente, os dados gerados neste trabalho também serão utilizados como base pelo fabricante, para atualização de registro do produto e inclusão da plataforma BD MAX™ System (Fab.: BD Diagnostics, Ref. BD MAX™ System) como equipamento compatível com o kit, perante o órgão regulamentador (ANVISA).