Espectrometria de massas LCMS/MS na quantificação da prostaglandina em amostras de saliva aprimoramento e validação do método

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Ferrari, Letícia Alves de Lima
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: LCMS/MS; prostaglandin; prostaglandina; saliva
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-29092023-150917/

Os anti-inflamatórios não esteroidais são fármacos que exercem seu mecanismo de ação por meio da inibição da ação da enzima ciclooxigenase, que sintetiza mediadores inflamatórios, como a prostaglandina 2, para combater os sintomas de dor, febre e inflamação. Desta forma, a quantificação das concentrações de prostaglandinas representa um reflexo da atividade inflamatória e da ação da ciclooxigenase nos tecidos humanos. No entanto, não existem na literatura muitos estudos que relatam a quantificação da prostaglandina, especialmente em amostras de saliva um fluido biológico de fácil obtenção, que favorece a avaliação de moléculas como esta, por ser menos invasivas para o paciente, uma vez que para esses estudos são necessárias muitas amostras. Desta forma, este trabalho tem como objetivo avaliar a eficácia do método MEPS LCMS/MS na extração e detecção de PGE2 a partir de amostras de saliva humana e validar essa metodologia a partir de amostras de saliva de acordo com as normas da ANVISA. Para tal, foram coletadas amostras de saliva, antes e após a ingestão do AINE meloxicam, utilizado como ferramenta farmacológica AINES. Estas amostras de saliva foram submetidas à extração da prostaglandina pelo método de microextração por sorvente empacotado (MEPS), por ser mais rápido e fácil de conduzir. Já para a determinação da concentração da prostaglandina presente nas amostras de saliva foi utilizada a cromatografia líquida acoplada ao espectrômetro de massas (LC MS/MS). Notou-se a diminuição dos níveis de prostaglandina E2 após a ingestão do medicamento, esses níveis começam a diminuir até 5 horas, voltando ao normal nas horas seguintes. Nos testes de validação foi possível confirmar a linearidade das amostras, obtendo um coeficiente de correlação de r2= 0,9888791 e a equação linear obtida foi de (x)= 540,783*x+447,083 e nos testes de precisão e exatidão o resultado foi inferior a 15%. Desta forma, a metodologia de extração e quantificação de prostaglandinas a partir de saliva humana testadas, mostraram-se rápidas e eficazes, de acordo com os critérios da ANVISA e podem ser utilizadas com segurança para tal finalidade.