Efeitos da modulação de PINK1 na progressão da doença de Alzheimer e na função mitocondrial utilizando Drosophila melanogaster como modelo

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Spegiorim, Giulia Covolo
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Alzheimer's disease; Disfunção mitocondrial; Doença de Alzheimer; Mitochondrial disfunction; Mitofagia; Mitophagy
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-17012025-113435/

A doença de Alzheimer (DA) é uma neuropatologia crônica e progressiva, que se manifesta principalmente pela perda de memória e cognição. Os principais hallmarks da doença são emaranhados fibrilares intracelulares e agregados beta-amiloide extracelulares com propriedades neurotóxicas, que durante a progressão da doença associam-se a um quadro de inflamação, estresse oxidativo e levam à morte neuronal. Devido ao declínio da produção de ATP e aumento do estresse oxidativo na progressão da patologia, acredita-se que a disfunção mitocondrial possa ser considerada um importante marcador da DA, podendo preceder o acúmulo de beta-amilóide e de NFTs. Dessa forma, o trabalho teve como objetivo investigar a relação entre o processo de mitofagia e a progressão da DA. Por meio do sistema de expressão UAS-Gal4, realizamos a modulação positiva e negativa da expressão do gene PINK1 em dois modelos de Drosophila melanogaster para a DA - um deles expressando de maneira pan-neural as proteínas humanas APP e BACE; e outro apenas o peptídeo Aβ42. Foram avaliados fenótipos comportamentais, como sobrevivência, escalada (locomoção) e memória, além de caracterização funcional das mitocôndrias no sistema nervoso central por meio da avaliação do consumo de oxigênio e da quantificação da produção de espécies reativas de oxigênio (EROs). Os resultados mostraram que, para o modelo APP-BACE, a super-expressão de PINK1 foi capaz de aumentar a expectativa de vida e reverter parcialmente o fenótipo de memória, mas não melhorou a locomoção dos animais. Apesar de não alterar o consumo de O2 nas cabeças dos animais, a modulação positiva de PINK1 reduziu significativamente a elevada produção de H2O2 no modelo. O RNAi de PINK1, nestes animais, foi responsável por um declínio mais acentuado na taxa de sobrevivência, e não produziu alterações significativas nos outros fenótipos analisados. No modelo Aβ42, as duas modulações aumentaram a sobrevivência dos animais, e o RNAi de PINK1 reverteu o baixo consumo de O2 e aumentou a produção de EROs pelas cabeças dos indivíduos. A superexpressão de PINK1, nesse caso, não gerou alterações significativas nos demais fenótipos (à exceção da sobrevivência). Em conjunto, esses resultados indicam que a modulação positiva da mitofagia mediada por PINK1/Parkin é capaz de aumentar a taxa de sobrevivência dos animais com DA; no entanto, por si só, não oferece recuperação completa do fenótipo, indicando possivelmente que as mitocôndrias sejam parte do caráter sistêmico e multifatorial da DA.