Genômica funcional: engenharia reversa por meio de métodos de altaperformance na saliva e sangue de pacientes com síndrome de Sjögren

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Florezi, Giovanna Piacenza
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Biomarcadores; Biomarkers; Metabolômica; Metabolomics; Proteômica; Proteomics; Saliva; Síndrome de Sjögren; Sjögren syndrome
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/23/23139/tde-08122022-142435/

A síndrome de Sjögren primária (SSp) é uma doença inflamatória autoimune de progressão lenta que afeta as glândulas exócrinas salivares e lacrimais. Sua principal manifestação é a síndrome sicca, que é caracterizada pela diminuição das secreções salivares e lacrimais levando ao sintoma de xeroftalmia e xerostomia. O diagnóstico da doença é possível por meio de avaliação clínica, sorológica e histológica de espécimes de biópsias. Entretanto, ainda não existem biomarcadores com evidência científica que permitam o diagnóstico com acurácia e o estabelecimento do prognóstico da doença. A sua fisiopatologia já foi previamente descrita, porém os mecanismos de desencadeamento da doença ainda não foram totalmente definidos. Por este motivo, este estudo teve como objetivo utilizar técnicas de alto desempenho para determinar o perfil metabólico e proteico de 19 pacientes do sexo feminino diagnosticadas com SSp, diagnosticadas de acordo com os critérios preconizados pelo consenso ACREULAR, comparadas a 20 voluntárias saudáveis. Todas as participantes tiveram seus dados clínico-demográficos analisados e submeteram-se a coleta de saliva e sangue, que foram analisadas quantitativamente com a técnica de espectrometria de massas associada a cromatografia, utilizando o sistema cromatográfico nanoElute nanoflow, da Bruker Daltonics (Bremen, Germany) acoplado online, a um espectrômetro de massas hybrid trapped ion mobility spectrometry-quadrupole time-of-flight mass spectrometertimsTof- Pro (Bruker Daltonics) para a análise proteômica e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas - GC-TOF/MS - Pegasus HT (LECO). Os dados foram analisados por meio de testes estatísticos uni- e multivariados, para determinar os metabólitos e proteínas de maior relevância estatística na discriminação entre os grupos controle e SS. A análise do metaboloma, revelou perfis distintos entre a saliva e sangue dos pacientes com SS e controle saudável, evidenciando compostos envolvidos na síntese de aminoácidos, purinas, metabolismo de lipídeos e diversos compostos derivados dos expossoma. O mesmo padrão foi observado no perfil proteico da saliva, que revelou proteínas envolvidas na diferenciação, ativação e proliferação de respostas imunológicas inatas e adaptativas; assim como proteínas envolvidas no metabolismo lipídico associado a processos inflamatórios. Por fim, a integração dos dados entre as duas técnicas permitiu a identificação dos genes GNAI2, B2MG, NGAL, SLUR2, HS90, SODC e A2GL, como potenciais marcadores envolvidos no desenvolvimento da doença.